[發明專利]一種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法

有效

• 申請號: 201310606732.0
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN103667460A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 杜杰;鄭帥;劉婷婷;樸春梅;謝道昕
• 申請（專利權）人: 北京市心肺血管疾病研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法。

背景技術

轉基因生物在聯合國公約《生物安全議定書》上，各個國家全部都接受的一個概念，稱做“改性活生物體”Living?Modified?Organisms，簡稱LMOs，或者叫“遺傳飾變生物”Genetically?Modified?Organisms，GMOs。LMOs或GMOs就是指憑借現代生物技術獲得的遺傳材料新異組合的活生物體。實際上就是將外源DNA導入生物體基因組，引起了遺傳改變，改變了遺傳組成的生物，就是轉基因生物。

從1996年開始，轉基因植物大面積的推廣，如轉基因大豆、轉基因玉米、轉基因番茄等。在世界上，美國是轉基因技術發展最快的國家，其國內轉基因農作物種類最多，種植面積也最大。目前美國60%以上的加工食品都是以轉基因農作物為原料。

腸道菌群是腸道內各類細菌的集合體。動物在漫長的進化過程中，已經與腸道菌群微生物形成了一種共生/寄生的關系。目前在人體腸道微生物系統中發現9個門的細菌，其中厚壁菌門(Firmicutes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)和變形桿菌門（Proteobacteria）是哺乳動物腸道中的主要細菌。

傳統的研究腸道微生物的方法，是通過分離腸道排泄物中的微生物，進行選擇性培養，或者是通過直接形態觀察來獲得部分信息，再進行鑒定和分類。這類方法費時費力，易受操作方法的影響，敏感度低，且在現有技術條件下能夠通過培養分離的微生物只占細菌總數的0.1%-1%左右，只能定性檢測可培養的細菌，不能鑒定未知的細菌，故不能正確的反映腸道菌群的數量和多樣性。

發明內容

本發明的目的是提供一種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法。

本發明提供的第一種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法，包括如下步驟：

（1）將NF-κB-luc轉基因小鼠分為兩組，第一組飼喂普通飼料，第二組飼喂待測飼料，所述待測飼料為待測食品與普通飼料的混合物；

（2）所述步驟（1）進行10周后，取小鼠的糞便，提取總DNA；

（3）取步驟（2）得到的總DNA，打碎，得到300-800bp的DNA片段；

（4）取步驟（3）得到的DNA片段，進行細菌16S?rRNA的高通量測序；

（5）根據測序結果，得到腸道菌群的組成，根據腸道菌群的組成進行如下結果判讀：如果第二組小鼠的糞便中厚壁菌門的相對豐度顯著高于第一組小鼠且具有統計學差異，待測食品中含有轉基因植物成分。

本發明提供的第二種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法，包括如下步驟：

（1）將NF-κB-luc轉基因小鼠分為兩組，第一組飼喂普通飼料，第二組飼喂待測飼料，所述待測飼料為待測食品與普通飼料的混合物；

（2）所述步驟（1）進行10周后，取小鼠的糞便，提取總DNA；

（3）取步驟（2）得到的總DNA，打碎，得到300-800bp的DNA片段；

（4）取步驟（3）得到的DNA片段，進行細菌16S?rRNA的高通量測序；

（5）根據測序結果，得到腸道菌群的組成，根據腸道菌群的組成進行如下結果判讀：如果第二組小鼠的糞便中Erysipelotrichia綱的相對豐度顯著高于第一組小鼠且具有統計學差異，待測食品中含有轉基因植物成分。

本發明提供的第三種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法，包括如下步驟：

（1）將NF-κB-luc轉基因小鼠分為兩組，第一組飼喂普通飼料，第二組飼喂待測飼料，所述待測飼料為待測食品與普通飼料的混合物；

（2）所述步驟（1）進行10周后，取小鼠的糞便，提取總DNA；

（3）取步驟（2）得到的總DNA，打碎，得到300-800bp的DNA片段；

（4）取步驟（3）得到的DNA片段，進行細菌16S?rRNA的高通量測序；

（5）根據測序結果，得到腸道菌群的組成，根據腸道菌群的組成進行如下結果判讀：如果第二組小鼠的糞便中Erysipelotrichales目的相對豐度顯著高于第一組小鼠且具有統計學差異，待測食品中含有轉基因植物成分。

本發明提供的第四種輔助檢測食品中是否含有轉基因植物成分的方法，包括如下步驟：

（1）將NF-κB-luc轉基因小鼠分為兩組，第一組飼喂普通飼料，第二組飼喂待測飼料，所述待測飼料為待測食品與普通飼料的混合物；