[發(fā)明專利]一種嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310599332.1
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN104651457A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉漢斌
• 申請（專利權(quán)）人: 劉漢斌
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域????

????本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

背景技術(shù)????

世界上微生物間的多樣化和變異性及物種生境的生態(tài)復(fù)雜性，帶來了探討、了解微生物的廣泛性、復(fù)雜性和長久性。微生物的一個(gè)物種就是一個(gè)獨(dú)特的基因庫，微生物的新陳代謝是錯(cuò)綜復(fù)雜的生命活動，在長期的生物進(jìn)化中，形成了一套完整統(tǒng)一的靈敏調(diào)節(jié)系統(tǒng)，依靠這種調(diào)節(jié)系統(tǒng)，嚴(yán)格控制各種代謝活動。有條不紊協(xié)調(diào)進(jìn)行并靈活適應(yīng)環(huán)境。不同培養(yǎng)基，因培養(yǎng)基配方不同，影響其生長和變異情況。

培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長時(shí)間的貯存，必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，現(xiàn)在均改制成粉末。

培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

?????本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué)，微生物學(xué)及無機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理，對不同的碳源、氮源、無機(jī)鹽類、維生素、生長促進(jìn)劑等諸類營養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選，對培養(yǎng)基的pH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較，研究出了本發(fā)明的培養(yǎng)基。

?????本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：

????一種嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2.5g/L酵母浸粉、0.065g/L脫脂奶粉、2.0g/L葡萄糖、4.0g/L氯化錳、15.0g/L瓊脂，?pH值為6.9-7.1。

????在以上方案的基礎(chǔ)上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20.0g?、乳糖10.0g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀4.0g，其余為蒸餾水。

????本發(fā)明還公開了嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，用于奶制品中嗜冷微生物的菌落總數(shù)測定。

????稱取本品24.25g?加入?1000ml?蒸餾水，不停攪拌加熱溶解，分裝試管，?分裝每管?10mL，并放入一個(gè)小倒管，115?℃?高壓滅菌?15?min?，迅速冷卻，備用。

????制備好的液體培養(yǎng)基保存于2?-8?℃，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處，保存溫度?2-30?℃。

??????本發(fā)明的有益效果：

??????1、培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；

??????2、菌生長迅速，變異率低；

??????3、便于觀察，分析。

具體實(shí)施方式???

實(shí)施例1：

???一種嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2.5g/L酵母浸粉、0.065g/L脫脂奶粉、2.0g/L葡萄糖、4.0g/L氯化錳、15.0g/L瓊脂，?pH值為6.9-7.1。

????在以上方案的基礎(chǔ)上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20.0g?、乳糖10.0g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀4.0g，其余為蒸餾水。

?????稱取本品24.25g?加入?1000ml?蒸餾水，不停攪拌加熱溶解，分裝試管，?分裝每管?10mL，并放入一個(gè)小倒管，115?℃?高壓滅菌?15?min?，迅速冷卻，備用。

????制備好的液體培養(yǎng)基保存于2?-8?℃，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處，保存溫度?2-30?℃。