[發明專利]一種基于HPLC?DAD法測定甲磺酸伊馬替尼含量及其雜質限度的方法

有效

• 申請號: 201310596053.X
• 申請日: 2013-11-21
• 公開（公告）號: CN103852544B
• 公開（公告）日: 2017-12-05
• 發明（設計）人: 蕭偉;傅小勤;仲艷;陳寶來;王振中;畢宇安;李家春;徐豐果;于丹
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 王學強

技術領域

本發明涉及一種基于HPLC-DAD法測定甲磺酸伊馬替尼含量及其雜質限度的方法。

背景技術

甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)，化學名為4-[(4-甲基–1-哌嗪)甲基]–N-{4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)–2-嘧啶基]氨基]苯基}苯甲酰胺甲磺酸鹽，商品名為格列衛，其結構式如下，是瑞士諾華(Novartis)公司研發的酪氨酸激酶抑制劑類藥物。其在美國、歐盟和日本等國獲得孤稀藥物地位，用于治療α-干擾素(interfereon–alfa)治療失敗胚細胞危象病期、加速病期或慢性骨髓性白血病和胃腸道間質細胞瘤。

從張小順等人關于伊馬替尼分析方法的綜述中可見，目前國內外對于甲磺酸伊馬替尼的分析方法(HPLC-MS、HPLC-MS-MS、毛細管電泳法、電化學分析方法等)主要集中在血藥濃度及生物利用度上，而對于原料藥及有關物質的檢測多采用離子對試劑辛烷基磺酸鈉溶液作為緩沖鹽，流動相配制復雜，且離子對試劑和固定相結合產生不可逆吸附，進而影響固定相活性位點，對色譜柱造成不可逆的傷害，會大大縮短色譜柱的使用壽命。離子對試劑對pH值比較敏感，且離子對試劑的濃度與樣品的保留時間有直接的影響，配制流動相時要求精確度較高，否則直接影響實驗的重復性和重現性。最近，Nageswari.A等人利用超高壓液相色譜法測定甲磺酸伊馬替尼及其降解產物，但是此法對于儀器要求較高，梯度洗脫程序復雜，且需要特殊的色譜柱(Waters Acquity UPLC BEH C18(50×2.1mm,1.7μm))。目前各國藥典均未收載其原料和制劑的標準，進口注冊標準（JX20040087）和國內關于伊馬替尼分析方法的報道，均采用離子對試劑辛烷基磺酸鈉作為緩沖鹽。

從現有的專利文獻及期刊論文公開的內容來看，目前國內外用于檢測伊馬替尼的方法主要是液相法和電位滴定法，所用流動相為辛烷基磺酸鈉離子對試劑、或多溶劑組合。研究人員發現，辛烷基磺酸鈉離子對試劑對色譜柱有影響，減少色譜柱的使用壽命。因此針對現有技術中所存在的技術問題，發明人經過理論分析和實驗研究，提供了一種新的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于HPLC-DAD法測定甲磺酸伊馬替尼含量及其雜質限度的方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種基于HPLC-DAD法測定甲磺酸伊馬替尼含量及其雜質限度的方法，采用C18色譜柱，以甲醇—三乙胺水溶液為流動相，所述三乙胺水溶液的體積百分濃度為0.5%～1%，pH值為7.5～11；梯度洗脫，流速為0.8～1.2mL/min，檢測波長為200～400nm；所述梯度洗脫的程序為0～55min，65%→15%三乙胺水溶液。

所述的檢測波長優選為268nm。

所述三乙胺水溶液的體積百分濃度優選為0.5%。

所述三乙胺水溶液的pH值優選為8。

所述色譜柱的柱溫為25～35℃，進樣體積為0.5～20μL。上述柱溫優選為30℃，上述進樣體積優選為10μL。

所述流速優選為1.0mL/min。

所述的C18色譜柱為Waters X-Terra RP18色譜柱、Welch Materials Xtimate C18色譜柱、Phenomenex Gmini C18色譜柱或Waters X-Bridge C18色譜柱。

本發明技術方案中所述的雜質為甲磺酸伊馬替尼工藝合成過程中可能產生的六個雜質及其可降解的產物。其中六個雜質為：雜質A：4-[(哌嗪-1-基)甲基]-N-{4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]氨基]苯基}苯甲酰胺；雜質B：4-[(4-甲基-1,4-二氧化哌嗪-1-基)甲基]-N-{4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]氨基]苯基}苯甲酰胺；雜質C：4-[(4-甲基-1-氧化哌嗪-1-基)甲基]-N-{4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]氨基]苯基}苯甲酰胺；雜質D：4-[(4-甲基-4-氧化哌嗪-1-基)甲基]-N-{4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]氨基]苯基}苯甲酰胺；雜質E：1,4-雙{4-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨甲?；鶀芐基哌嗪；雜質F：1–[4–甲基哌嗪基]芐甲酰基-{4-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨甲?；鶀芐基哌嗪。