[發明專利]一種蠟狀芽孢桿菌及其應用

無效

• 申請號: 201310595681.6
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN103805533A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 孫慶元;張雪崧
• 申請（專利權）人: 豆食代(大連)農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/085
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技術領域

本發明涉及一種蠟狀芽孢桿菌及其應用，具體地說，涉及一種蠟狀芽孢桿菌(Bacillus?cereus)QD5，所述蠟狀芽孢桿菌QD5可促進豆芽生長，屬于促生菌生物技術領域。?

背景技術

細菌不但可以與植物在體內共生，也可以在體外共生。體內共生關系最常見的例子就是豆科植物與固氮菌形成的根瘤。體外共生關系主要是指植物根際菌，是植物根系與土壤之間的界面中的細菌和真菌。根際細菌對調節植物根系從土壤中吸收養分和通過分泌植物生長調節素調節植物的生長起著至關重要的作用。國內外報道較多的是假單胞桿菌(Pseudomonas)、芽孢桿菌(Bacillus)、布克霍爾德氏菌(Burkholderia)在植物根際具有抗病促生作用，所述菌類對作物生長促進或抑制取決于作物本身的性質以及細菌的種類和數量。?

豆芽是市民菜籃子中一個很重要的品種，由于其發育過程主要靠種子自身貯藏的營養物質，不需要補充吸收礦物質營養和進行光合作用，是一種簡便的無土栽培形式，可就地取材，不受時間、地點的限制，一年四季均可栽培，時間短、周轉快，維生素豐富，對調節蔬菜淡季供應起著重要作用。為了提高豆芽的生產量，縮短生產周期，同時抑制在生產過程中豆芽腐爛病菌的生長繁殖，在不施用任何農藥、化肥、添加劑的條件下，施用促生菌是有效的技術手段之一。在國內外從植物根際分離篩選很多微生物并作為菌肥已經廣泛應用于農業生產，但是，利用促生菌促進豆芽生長還未見報道。?

在我國，食品安全已成為千家萬戶關注的問題。食品安全不僅直接關系人民群眾的身體健康和生命安全，而且還影響經濟和社會的穩定，隨著社會的發展，食品本身也蘊含了人類的進步和文明。豆芽是人們最為喜歡的蔬菜品種之一。利用促生菌生產豆芽不僅可向市場提供無毒有機的豆芽，而且促生菌可提高豆芽的產量、縮短生產周期，提高生產效率，具有良好的經濟和社會效益。?

發明內容

針對現有技術中尚無一種蠟狀芽孢桿菌作為促進豆芽生長的促生菌的缺陷，本發明的目的之一在于提供一種蠟狀芽孢桿菌QD5，本發明的目的之二在于提供一種蠟狀芽孢桿菌QD5作為豆芽促生菌的應用。?

本發明的目的是通過以下技術方案實現的。?

一種蠟狀芽孢桿菌(Bacillus?cereus)QD5(以下簡稱QD5菌株)，所述QD5菌株是通過對大豆、綠豆、花生和苜蓿的幼苗根際土壤樣品進行篩選、馴化選育獲得的；所述QD5菌株于2013年10月10日，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCG)，保藏編號為CGMCC?No.8316。?

QD5菌株具有下述特征與性質：?

(1)形態特征及生理生化性質?

在LB瓊脂平板培養基上，37℃，培養24h，形成圓形或近似圓形、質地軟、無色素、稍有光澤的白色菌落(似蠟燭樣色)，直徑5mm～7mm。在顯微鏡下，呈桿狀，芽孢圓形，中端或次端生，包囊無明顯膨大。菌體細胞桿狀，末端方，成短或長鏈，1.0～1.2×3.0～5.0μm。革蘭氏陽性，無莢膜，運動。菌落大，表面粗糙，扁平，不規則。?

(2)分子生物學鑒定?

利用16S?rDNA的通用引物Seq?forward(5′-GAGCGGATAACAATTTCACACAGG-3′)、Seq?reverse(5′-CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC-3′)和Seq?internal(5′-CAGCAGCCGCGGTAATAC-3′)，以QD5菌株的基因組DNA作為模板進行PCR擴增，得到PCR產物，回收，測序，得到QD5菌株的16S?rDNA基因全序列，見序列表SEQ?ID?No.1；所述序列通過美國國家生物技術信息中心(NCBI)的BLAST檢索程序系統進行序列同源性分析，發現與芽胞桿菌屬(Bacillus)的蠟狀芽胞桿菌(Bacillus?cereus)的ITS(internal?transcribed?spacers)序列99％同源，如表1所示，與已知蠟狀芽胞桿菌至少存在1％的非同源性差異，說明所述QD5菌株為新菌株。?

表1?QD5菌株與已知菌株的ITS序列的最大同源性?