[發明專利]一種四川省松茸的產地屬性DNA指紋圖譜的建立方法

無效

• 申請號: 201310594630.1
• 申請日: 2013-11-21
• 公開（公告）號: CN103571965A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 陳麗萍;劉忠民;陳蕓;趙永昌;陳立佼;陳衛民;李樹紅;岳亮亮;李旻;丁元明;楊玲春;滕平;王裔耿;李云飛;殷紅;陳宏仙;顏慶;傅士華
• 申請（專利權）人: 云南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 昆明大百科專利事務所 53106
• 代理人: 何健

技術領域

本發明涉及中國四川松茸主產區的松茸產地屬性的DNA指紋圖譜的建立方法，以及由該方法所得相應的DNA指紋圖譜。

背景技術

松茸隸屬擔子菌門（Basidiomycota）、擔子菌綱（Basidiomycetes）、傘菌目（Agaricales）、口蘑科（Tricholoma）、口蘑屬（Tricholoma）^[1]。全球已報道了15個種，我國已記載了5個種一個變種，即松茸（T.matsutake）、假松茸（T.bakamatsukake）、青崗覃（T.quercicola）、粗壯口蘑（T.robustum）、黃褐口蘑（T.fulvoeastaneum）和臺灣松茸變種（T.matsutake），松茸是一種外生菌根真菌類，由菌絲體、子實體和孢子組成，本發明所指的松茸是T.matsutake這個品種，且指可食用的子實體部分，也就是人們在市場上見到的松茸菌。

松茸是一種味道鮮美、口感上乘、氣味濃郁獨特、營養價值高、具有食療效果的純天然食用菌。目前尚不能人工馴化栽培，基本上都野生菌，所以來自不同分布區域的松茸擁有產地屬性。本發明只針對新鮮松茸，松茸加工制品中，DNA可能發生斷裂和降解，且目前多數松茸加工品不具有產地屬性，沒有對其進行產地溯源的需要。

日本是松茸的最大消費國，也是最大的進口國。我國松茸主要出口至日本，其中鮮松茸的出口量占日本進口量的43%，具有巨大的海外貿易價值。

我國松茸的主產區是云南、四川、吉林和黑龍江，其中云南的產量最大，吉林和黑龍江第二，四川第三。

目前東北生產的鮮松茸從吉林口岸出口，云南、四川和西藏鮮松茸從云南出入境口岸出口，但有時東北產的松茸也會從云南口岸出口。因此做好松茸的資源保護以及針對性出口管理，對松茸出口產業事關重大。

中國四川地區的松茸的多分布在甘孜州和涼山州的海拔為3000-4000米的原始森林區。交通不便，氣候寒冷，人煙稀少，多是高山少數名族居住于附近。目前多是由當地高山貧困少數民族開始對其進行采摘并賣給當地的松茸出口收購商，這已成為這些少數民族特別是藏族和彝族脫貧致富的主要經濟來源。因此，松茸的順利出口關系到這些少數民族的經濟收入，關系到此地民族的團結和政治穩定。

松茸雖然是純天然的野生食用菌，但是生長地分散，采摘人員多半是居住于附近的當地居民——散戶，從采擷到出口還要經歷很多環節，面對出口國特別是日本苛刻的進口食品貿易壁壘，檢驗檢疫部門必須對松茸的采摘到出口的全過程進行質量安全控制和溯源管理，盡可能保證松茸的順利出口。另外，日本也要求我國提供對日出口的松茸的官方原產地證明。

中國國家質量監督檢驗檢疫總局制定了《出口鮮松茸質量安全控制要求》指出“在強化檢驗把關中指出“指導出口企業避免從農殘和重金屬污染嚴重的地區收購原料，降低農殘和重金屬含量超標的風險”。雖然檢驗檢疫監督管理部門按照溯源管理措施，要求企業對產地進行編號管理，按照原料來源分產地加工、存儲堆放，在報檢時必須提供該批出口松茸原料溯源管理網絡圖，但實際情況是企業履行得并不嚴格，這給經出口口岸檢驗檢疫部門檢驗發現殘留監控不合格的松茸的溯源造成困難，為了保護云南口岸出口的持續性，以及更有效、更有針對性對某個地區進行松茸質量的管理，管理監管部門除了依靠企業誠信備案登記外，還需要能識別松茸的產地屬性的技術手段，用于區別產地來自云南以及產地來自非云南的松茸貨品。

中國整個西南地區的松茸外觀相近，氣味相同，微有口感上的差異，且不同成熟期松茸子實體外觀會發生變化，受此影響，僅從感官判斷不易辨別產地。王明富等研究者就認為中國西南地區的松茸和日本的松茸即使地理跨度較大，但形態接近，菌絲體不拮抗，屬同一品系的松茸。

以松茸含有的總蛋白以及多糖類進行分析，這些營養物質在松茸的不同成熟期表達量的不同，受此影響，由此得到的化學分析數據不能用于產地溯源。

相對于感官以及營養成分的分析，遺傳物質的特性不會隨著菌體生長而發生顯著改變，相對于一個個體，遺傳物質從幼到老基本都是穩定的。

但沙濤等認為滇產松茸的IGS1-RFLP與日產松茸的主要類型十分相似，認為滇產的和日產的松茸可能是同源的。