[發(fā)明專利]一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310593867.8 | 申請日： | 2013-11-22 |
| 公開（公告）號： | CN103548699A | 公開（公告）日： | 2014-02-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 蔡玲;姚瑞玲;劉海龍;吳幼媚 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114 | 代理人： | 鄒超賢 |
| 地址： | 530002 廣西壯*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 松樹 莖段組培芽 誘導(dǎo) 增殖 培養(yǎng) 方法 | ||
1.一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法，其特征在于：組培莖段選擇與處理、組培芽誘導(dǎo)、繼代增殖擴(kuò)繁、叢生芽伸長和壯芽培養(yǎng)等組培技術(shù)體系，獲得優(yōu)質(zhì)高脂松樹芽，其操作步驟如下：
（1）組培莖段選擇與處理??
高脂松樹的組培莖段芽選自年產(chǎn)松脂4-4.5kg/a.株的高脂松樹穗條嫁接成活的植株，剪取春季萌發(fā)的半木質(zhì)化嫩枝稍，長6-10cm,用苯扎溴銨按常規(guī)方法清洗，然后用自來水沖洗十浸泡15min，洗去嫩枝稍上的塵埃和苯扎溴銨，再將嫩枝稍裁成1-2cm長的莖段，視木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi)，用0.1%新吉爾滅浸泡10-15min，在無菌條件下，用0.15%HgCl2滅菌消毒3-5min，無菌水沖洗3-4次，再用0.1%HgCl2滅菌消毒4-6min，無菌水沖洗4-5次后，將滅菌消毒的莖段放在無菌濾紙上將水吸干；
（2）組培芽誘導(dǎo)
將無菌莖段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行組培芽誘導(dǎo)，組培芽誘導(dǎo)的方法是：先置溫度7-10℃的環(huán)境,暗培養(yǎng)5-7d，再轉(zhuǎn)入溫度20-25℃,光照強(qiáng)度1200-2000lux,光照12-14h/d條件下培養(yǎng)50-60d，形成初代芽；
（3）芽繼代增殖擴(kuò)繁
將初代芽接入增殖擴(kuò)繁培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖擴(kuò)繁，繼代增殖擴(kuò)繁控制溫度17-20℃光照強(qiáng)度2000-4000lux，光照10-14h/d，培養(yǎng)5-7d，再在溫度20-25℃，光照強(qiáng)度2000-4000lux，光照10-14h/d的條件下培養(yǎng)15-20d，經(jīng)2-3次繼代增殖擴(kuò)繁周期形成叢生芽,平均增殖系數(shù)6.95以上；
（4）叢生芽伸長
將高＜1cm的芽叢接入伸長培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽伸長，叢生芽伸長控制溫度17-20℃，光照強(qiáng)度2000-4000lux，光照10-14h/d，培養(yǎng)5-7d，再在溫度22-25℃，光照強(qiáng)度2000-4000lux，光照10-14h/d的條件下培養(yǎng)20-25d，得到長2-3cm的伸長叢生芽；
（5）壯芽培養(yǎng)
將高≥2cm的單芽切下，插入壯芽培養(yǎng)基中，溫度20-25℃，光照強(qiáng)度2000-4000lux，光照10-14h/d，培養(yǎng)壯芽；將＜1cm的芽叢，接入繼代增殖擴(kuò)繁培養(yǎng)基中，繼續(xù)進(jìn)行叢生芽的增殖擴(kuò)繁培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法，其特征在于：所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為：1/2改良DCR十6-BA3-5mg/L十NAA0.5-1.0mg/L十VC15?mg/L?十椰子汁40-60ml/L十瓊脂粉3.8g/L十蔗糖20g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法，其特征在于：所述的增殖擴(kuò)繁培養(yǎng)基配方為:1/2改良DCR十6-BA0.5-3mg/L十NAA0.05-0.5mg/L十VC15mg/L十椰子汁10-30ml/L十瓊脂粉3.8g/L十蔗糖20g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法，其特征在于：所述的伸長培養(yǎng)基配方為：改良DCR十6-BA0.1-0.3mg/L十NAA0.05-0.2mg/L十椰子汁10-20ml/L十活性碳3g/L十瓊脂粉4.0g/L十蔗糖20g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法，其特征在于：所述的壯芽培養(yǎng)基配方為：改良DCR十瓊脂粉4.0g/L十蔗糖20g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高脂松樹莖段組培芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)的方法，其特征在于：所述的改良DCR培養(yǎng)基配方為：DCR十NH4NO3250?mg/L十谷氨酰胺5mg/L。
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