[發明專利]骨髓染色體提取試劑盒

有效

• 申請號: 201310592347.5
• 申請日: 2013-11-22
• 公開（公告）號: CN103710435A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 程建兵;夏成青;陳紅梅;郭福曉;生帥
• 申請（專利權）人: 福州艾迪康醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 杭州裕陽專利事務所(普通合伙) 33221
• 代理人: 江助菊

技術領域

本發明屬生命科學和生物技術領域，特別涉及一種骨髓染色體提取的試劑盒，用于進行骨髓染色體核型分析。

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背景技術

G顯帶因為染色體主要是被Giemsa染料染色后而顯帶，故稱之為G顯帶技術，其所顯示的帶紋分布在整個染色體上。人們將用各種不同的方法，以及用不同的染料處理染色體標本后，使每條染色體上出現明暗相間，或深淺不同帶紋的技術稱為顯帶技術（banding?technique）。本世紀70年代以來，顯帶技術得到了很大發展，且在眾多的顯帶技術中（Q帶、G帶、C帶、R帶、T帶），G帶是目前被廣泛應用的一種帶型。

研究發現，人染色體標本經胰蛋白酶、Na0H、檸檬酸鹽或尿素等試劑處理后，再用Giemsa染色，可使每條染色體上顯示出深淺交替的橫紋，這就是染色體的G帶。每條染色體都有其較為恒定的帶紋特征，所以G顯帶后，可以較為準確的識別每條染色體，并可發現染色體上較細微的結構畸變。

近年來，隨著分子生物學與細胞遺傳學的發展，骨髓染色體核型分析在血液系統疾病的診斷、治療和預后中發揮了越來越重要的作用。骨髓染色體的制備因骨髓中有大量脂肪顆粒的干擾,?骨髓中各種細胞系的細胞周期不固定,?不統一,?難以區別對待而使得骨髓染色體分裂指數低,?染色體短粗,?分散度差，且成本較高。

因此，建立一種具有分裂相多、分散度好、帶紋清晰、長度適中等特征的骨髓G帶制作方法尤為重要。

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發明內容

本發明的目的是克服現有技術的缺陷，提供一種骨髓染色體提取試劑盒，所述試劑盒包括試劑1、試劑2、試劑3和試劑4組成的液體型試劑，其中試劑1的各組分及濃度范圍為：

????基礎培養基為RPMI1640，所述的各添加成分用量為：

青霉素/鏈霉素??????????????????????????????5-15ul/ml?

胎牛血清?????????????????????????????????60-140?ul/ml

人類淋巴瘤細胞培養物?????????????????????60-140?ul/ml

試劑2的成分及濃度范圍為：

溴化乙錠??????????????????????1.5～5.5mg/ml

試劑3的成分及濃度范圍為：

秋水仙胺??????????????????????8～15μg/ml

試劑4的成分及濃度范圍為：

氯化鉀???????????????????????0.050～0.090mol/L

進一步地，所述試劑1的各組分及濃度范圍為：

????基礎培養基RPMI1640，所述的各添加成分用量為：

青霉素/鏈霉素????????????????????????????8-12ul/ml?

胎牛血清?????????????????????????????????80-120?ul/ml

人類淋巴瘤細胞培養物?????????????????????80-120?ul/ml

所述試劑2的成分及濃度范圍為：

溴化乙錠??????????????????????2.5～4.5mg/ml

所述試劑3的成分及濃度范圍為：

秋水仙胺??????????????????????10～13μg/ml

所述試劑4的成分及濃度范圍為：

氯化鉀???????????????????????0.060～0.080mol/L

進一步地，所述試劑1的各組分及濃度范圍為：

基礎培養基RPMI1640，所述的各添加成分用量為：

青霉素/鏈霉素???????????????????????????8ul/ml?

胎牛血清????????????????????????????????96ul/ml

人類淋巴瘤細胞培養物????????????????????96ul/ml

所述試劑2的成分及濃度范圍為：

溴化乙錠??????????????????????3?mg/ml

所述試劑3的成分及濃度范圍為：

秋水仙胺??????????????????????12μg/ml

所述試劑4的成分及濃度范圍為：

氯化鉀???????????????????????0.075mol/L