[發明專利]一株產纖維素酶菌株及其應用

無效

• 申請號: 201310589231.6
• 申請日: 2013-11-20
• 公開（公告）號: CN103555595A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 陳樹林;張粲;宗志友;賈文娣;赫榮琳;武改紅;李晨;張東遠
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N15/01;C12N9/42;C12R1/80
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

1.一株產纖維素酶的菌株，其特征在于，所述菌株在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏號為：CGMCC?No.8339，分類命名為：青霉菌株Penillium?piceum?H16。

2.如權利要求1所述產纖維素酶的菌株，其特征在于，所述青霉菌株H16是將菌株Penillium?piceum?9-3經誘變方法處理后篩選得到的。

3.一株如權利要求2所述的產纖維素酶菌株的誘變篩選方法，其特征在于，向所述菌株Penillium?piceum?9-3的孢子懸液中添加硫酸二乙酯進行10～120min誘變反應。

4.如權利要求3所述產纖維素酶的誘變篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)在所述菌株Penillium?piceum?9-3的所述孢子懸液中添加硫酸二乙酯，所述硫酸二乙酯添加量為使所述孢子懸液中硫酸二乙酯的質量百分比濃度為0.8～1.2％，之后在10～30℃，50～150rpm震蕩反應10～120min，獲得所述孢子懸液的誘變處理液，備用；

2)以所述反應時間為準，每間隔8～12min取出0.1～0.3mL誘變處理液與硫代硫酸鈉溶液進行混合中和所述誘變處理液中的硫酸二乙酯以終止誘變反應，獲得誘變終止液并根據時間順序編號；

3)將編號的所述誘變終止液按順序分別涂布PDA平板，25～33℃培養直至長出單菌落；

4)將所述單菌落通過對比在剛果紅平板上透明圈與菌落直徑之比的大小和發酵培養測定粗酶液酶活力的方法篩選得到所述青霉菌株H16。

5.如權利要求3所述產纖維素酶的菌株的誘變篩選方法，其特征在于，所述步驟1)所述硫酸二乙酯的質量百分比濃度為1％，反應時間為60min。

6.如權利要求2所述產纖維素酶的菌株，其特征在于，所述青霉菌株H16應用于生產纖維素酶。

7.一株應用權利要求3～5中任一項所述的產纖維素酶菌株產纖維素酶的方法，其特征在于，用于培養所述產纖維素酶菌株的培養基的組分含量為：微晶纖維素10～30g/L，葡萄糖1～10g/L，玉米漿干粉10～20g/L，硫酸銨1～10g/L，磷酸二氫鉀1～10g/L，硫酸鎂1～10g/L以及加水至1L。

8.如權利要求7所述產纖維素酶菌株產纖維素酶的方法，其特征在于，所述培養條件為：溫度為26～32℃，轉速為150～250rpm震蕩培養，初始pH為5.0～6.0，接種量為1～5％，發酵培養時間為96～144h。

9.如權利要求8所述產纖維素酶菌株產纖維素酶的方法，其特征在于，所述培養條件為：初始pH為5.5，發酵培養時間為120h。