[發明專利]一種核酸適配體基光電化學檢測汞離子的方法

無效

• 申請號: 201310586598.2
• 申請日: 2013-11-19
• 公開（公告）號: CN103558275A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 薛延;石建軍;李紅波;王偉
• 申請（專利權）人: 安徽理工大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30
• 代理公司: 北京雙收知識產權代理有限公司 11241
• 代理人: 王菊珍

1.一種核酸適配體基光電化學檢測汞離子的方法，其特征在于：采用構建的“On-Off”型核酸適配體基光電化學傳感器用于檢測不同濃度的汞離子；所述“On-Off”型核酸適配體基光電化學傳感器是基于槲皮素銅敏化苝四羧酸-氧化石墨烯異質結的光電化學傳感器。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述“On-Off”型核酸適配體基光電化學傳感器的構建方法為：

（1）制備苝四羧酸/氧化石墨烯異質結；

（2）取苝四羧酸/氧化石墨烯異質結溶液滴涂于玻碳電極表面于室溫下晾干制得苝四羧酸/氧化石墨烯異質結修飾電極；

（3）將氨基化T堿基（適配體）固定于經EDC-NHS活化后的苝四羧酸/氧化石墨烯異質結修飾電極表面；

（4）接著用TE緩沖液淋洗其表面，然后，將0.25～1μmol?L^-1的氨基化T堿基溶液滴涂其電極表面，于4℃下溫育過夜后用TE緩沖液淋洗其表面；然后，取0.25～1μmol?L^-1的Poly?A溶液滴涂其電極表面，于37℃下溫育后用TE緩沖液淋洗其表面；最后，將5～20μmol?L^-1的槲皮素銅乙醇溶液滴涂其電極表面，于37℃下溫育后用TE緩沖液淋洗其表面。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述步驟（1）中苝四羧酸/氧化石墨烯異質結的制備方法如下：配制1×10^-4mol?L^-1的苝四羧酸DMF溶液和1mg?mL^-1的氧化石墨烯溶液，然后苝四羧酸溶液和氧化石墨烯溶液以5：1的體積比充分混合、靜置，即生成苝四羧酸/氧化石墨烯異質結。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述步驟（3）中修飾電極的活化方法如下：將20μL5mmol?L^-1EDC和10mmol?L^-1NHS的pH7.4的Tris-HCl溶液滴至苝四羧酸/氧化石墨烯異質結修飾電極表面，并于室溫下活化1～2h。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：將構建好的“On-Off”型核酸適配體基光電化學傳感器于0.1mol?L^-1磷酸鹽緩沖溶液中、在偏電位0.2V及大于450nm的光輻射下采用電流-時間技術檢測不同濃度的汞離子。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法為超靈敏及特異性檢測，檢出限為3.3fmol?L^-1。