[發明專利]一種促進上皮細胞藥物傳輸的聚合物納米顆粒的制備方法

無效

• 申請號: 201310586144.5
• 申請日: 2013-11-15
• 公開（公告）號: CN103610644A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 韓志超;許杉杉;佴剛
• 申請（專利權）人: 無錫中科光遠生物材料有限公司
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K47/34;A61K31/428
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種聚合物納米顆粒的制備方法，尤其涉及一種可以提高在犬腎上皮連續細胞(MDCK)中傳輸的PLGA聚合物C6-聚合物納米顆粒的制備方法。

背景技術

以上皮組織為代表的生物障礙層可以控制外生底物的吸收并且保護其免受細菌微生物的入侵。上皮細胞最主要的特征就是極性，由于脂質組成和蛋白質分布的多樣性，上皮細胞的質膜分為底端分生膜和基質分生膜，選擇性地控制不同底物的傳輸，緊密連結的存在使得上皮細胞膜成為一種特別緊湊的障礙層。臨床上，因為上皮細胞在人體全身都有分布，具有不同支配功能的藥物都會承受來自上皮細胞單層的阻力。特別是對于水溶性和膜通透性較差的藥物，上皮細胞對藥物在胃腸道的吸收的阻礙會使它們的生物利用度和治療效果大大的減弱，如何克服上皮障礙層并且加速藥物的傳輸在藥劑科學領域內一個很大的挑戰。

納米技術的應用是一種克服上皮障礙層的主要的方法。同純的藥物相比，聚合物納米顆粒可以調節細胞的攝入路徑并且促進負載在聚合物納米顆粒上的藥物在上皮細胞單層中的傳輸。作為一種代表性的聚合物納米顆粒，聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)納米顆粒由于其良好的生物相容性和生物可降解性已經廣泛應用為藥物傳輸系統。利用不同的制備方法，這類聚合物納米顆粒的尺寸可以根據需要在50～300nm的范圍內進行調節，具有不同溶解性的藥物可以利用不同的方法負載到這類納米顆粒上以提高其生物利用率；不同的表面和結構改性也影響PLGA納米顆粒在細胞的吸收和傳輸效率。

發明內容

聚合物納米顆粒的傳輸包括通過胞吞浸入到細胞質、胞內傳輸、以及通過細胞外吐脫離細胞的過程；本發明涉及的PLGA聚合物納米顆粒可以提高納米顆粒在上皮細胞膜中的傳輸，同時也促進不同細胞的細胞內傳輸。

一種可以提高在犬腎上皮連續細胞(MDCK)中傳輸的聚合物納米顆粒的制備方法，具體步驟如下：

(1)聚合物納米顆粒用一種乳液溶劑蒸發的方法制備：10mgPLGA溶解到5mL的丙酮中，室溫下在3000～5000rpm的轉速下，有機相慢慢倒入含有10mgF68的30mL水相中，攪拌30～60min后，得到初始的乳液。

(2)初始的乳液轉移到一個100mL的反應瓶中，在50℃下蒸發30min，得到納米顆粒懸浮液，納米顆粒的懸浮液在12000～20000rpm的轉速下離心10～15min，得到的團聚物分散后即得到PLGA納米顆粒。

(3)用同樣的方法制備C6-聚合物納米顆粒：5μg的香豆素-6溶解到5mL的丙酮中，室溫下在3000～5000rpm的轉速下，有機相慢慢倒入含有10mgF68的30mL水相中，攪拌30～60min后，得到初始的乳液。初始的乳液轉移到一個100mL的反應瓶中，在50℃下蒸發30min，得到納米顆粒懸浮液，納米顆粒的懸浮液在12000～20000rpm的轉速下離心10～15min，得到的團聚物分散后即得到C6-聚合物納米顆粒。

本發明中，MDCK細胞被選作上皮障礙層的模型，PLGA納米顆粒代表聚合物納米顆粒，PLGA聚合物納米顆粒可以調節MDCK細胞的攝入路徑，促進負載在PLGA聚合物納米顆粒上的藥物在上皮細胞單層中的傳輸。

具體實施方式

為了加深對本發明的理解，下面結合具體實例對本發明做進一步的詳述：

聚合物納米顆粒的制備步驟：

(1)聚合物納米顆粒用一種乳液溶劑蒸發的方法制備：10mgPLGA溶解到5mL的丙酮中，室溫下在3000rpm的轉速下，有機相慢慢倒入含有10mgF68的30mL水相中，攪拌30min后，得到初始的乳液。

(2)初始的乳液轉移到一個100mL的反應瓶中，在50℃下蒸發30min，得到納米顆粒懸浮液，納米顆粒的懸浮液在12000rpm的轉速下離心15min，得到的團聚物分散后即得到PLGA納米顆粒。

(3)用同樣的方法制備C6-聚合物納米顆粒：5μg的香豆素-6溶解到5mL的丙酮中，室溫下在3000rpm的轉速下，有機相慢慢倒入含有10mgF68的30mL水相中，攪拌30min后，得到初始的乳液。初始的乳液轉移到一個100mL的反應瓶中，在50℃下蒸發30min，得到納米顆粒懸浮液，納米顆粒的懸浮液在12000rpm的轉速下離心15min，得到的團聚物分散后即得到C6-聚合物納米顆粒。