[發明專利]一種用于角膜組織移植的PLGA纖維膜的制備方法

有效

• 申請號: 201310585879.6
• 申請日: 2013-11-15
• 公開（公告）號: CN103603138A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發明（設計）人: 韓志超;許杉杉;佴剛
• 申請（專利權）人: 無錫中科光遠生物材料有限公司
• 主分類號: D04H1/435
• 分類號: D04H1/435;D04H1/728;A61L27/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種纖維膜的制備方法，尤其涉及一種用于角膜組織移植、可生物可降解的PLGA纖維膜的制備方法。

背景技術

目前世界上僅僅有幾個專科眼科實驗室可以用纖維蛋白或者人體羊膜實現角膜上皮細胞到角膜的轉移。一種用人工培養細胞的方法就是讓細胞在角膜移植物上原位生長，這樣至少可以在實驗室水平上對那些單一角膜干細胞不足的病人來說可以避免角膜上皮細胞擴展的需要。

全厚度的角膜移植可以暫時修復患有角膜干細胞缺乏的病人的視力，但是最終因為必需的角膜干細胞的缺乏將會使移植失敗。為了代替喪失的干細胞，角膜上皮細胞的培養及轉移，是世界上很多專科中心治療病人的一種可以選擇的方法，任何可能的時候可以從病人的另一只沒有感染的眼睛進行細胞的培養，或者從捐獻者的眼中提取，后者往往需要經歷更長時間的免疫反應。

現有技術已經用合成的或天然的材料來代替人體羊膜。這樣的材料包括纖維蛋白、膠原蛋白膜、熱響應型基底和合成高分子膜，這些材料中只有人體角膜和纖維蛋白膜可以用作臨床角膜再生中細胞轉移的載體。

用于傳輸角膜干細胞的膜所必須有的特征就是它可以牢固的粘附細胞并且支撐它們的增殖和轉移。另外，這種膜必須具有臨床上最低的危險性，而且能夠固定到細胞培養的眼睛上并且在幾周之后將角膜干細胞牢固地附著到角膜上之后自身降解掉且不會引起免疫反應。

發明內容

本發明的目的是簡化和安全化用于角膜干細胞不足造成視力喪失的病人的角膜上皮細胞再生的方法，建立一種合成的、無菌的可以快速降解的膜，這種膜可以直接用作人體羊膜的代替物以開發實驗室培養細胞和小的角膜移植物上的細胞生長。現成的膜和角膜上皮細胞培養的結合可以使這項技術對很多手術和原來只有在很少的角膜干細胞治療中心才可以接受治療的病人來說都變得可取。

本發明中用靜電紡絲的方法制備了一種用于角膜組織移植、可生物降解的PLGA纖維膜的制備方法，具體步驟如下：

(1)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)(60∶40，分子量為60kg／mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt％的溶液。然后將溶液裝入到四個10mL的注射器中，注射針的內徑為0.4mm；注射器與注射泵連接，靜電紡絲的參數為：聚合物溶液的流速為0.8～1.2mL／h，紡絲電壓為20～35kV，接收端裝置為覆蓋有聚四氟乙烯纖維布的轉速為3500～5000rpm的轉筒；最后得到的膜的厚度為80～120μm。

(2)在25℃和溫和的攪拌前提下將聚合物溶解在1，1，1,3,3,3-六氟異丙醇中配制成不同濃度(40wt％、60wt％)的紡絲液。將聚合物溶液裝入到10mL的塑料注射器中，連接的注射針的內徑為0.4mm。紡絲參數如下：紡絲電壓為20～35kV，接收裝置為旋轉的圓筒(直徑100mm，長度300mm)，紡絲距離為150mm。得到的膜在25℃下真空干燥48h以徹底地去除掉溶劑。

本發明涉及的纖維膜支持分離的角膜上皮細胞快速生長，將完好的組織移植物直接放到膜上時角膜上皮細胞具有向外生長的能力。分離的細胞或者從角膜移植物上向外生長的細胞在本發明所制備的膜上有很好的傳輸性能。

具體實施方式

為了加深對本發明的理解，下面結合具體實例對本發明做進一步的詳述：

(1)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)(60∶40，分子量為60kg／mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt％的溶液，然后將溶液裝入到四個10mL的注射器中，注射針的內徑為0.4mm；注射器與注射泵連接，靜電紡絲的參數為：聚合物溶液的流速為0.8mL／h，紡絲電壓為20kV，接收端裝置為覆蓋有聚四氟乙烯纖維布的轉速為3500rpm的轉筒；最后得到的膜的厚度為80～120μm。

(2)在25℃和溫和的攪拌前提下將聚合物溶解在1，1，1,3,3,3-六氟異丙醇中配制成不同濃度(40wt％、60wt％)的紡絲液。將聚合物溶液裝入到10mL的塑料注射器中，連接的注射針的內徑為0.4mm；紡絲參數如下：紡絲電壓為20kV，接收裝置為旋轉的圓筒(直徑100mm，長度300mm)，紡絲距離為150mm，得到的膜在25℃下真空干燥48h以徹底地去除掉溶劑。