[發(fā)明專利]一種通過復(fù)合誘變對DHA菌株進(jìn)行選育的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310583975.7
• 申請日: 2013-11-20
• 公開（公告）號: CN103642790A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周懂懂
• 申請（專利權(quán)）人: 周懂懂
• 主分類號: C12N15/01
• 分類號: C12N15/01;C12N13/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種實驗方法，具體來說，是指一種通過復(fù)合誘變對DHA菌株進(jìn)行選育的方法。?

背景技術(shù)

目的菌種蹄選一般有兩條途徑：一是從自然界中某些含有菌群的材料中，同特定的操作過程分離蹄選得到所需有用菌株是以已有的菌株包括保藏菌株為出發(fā)菌株，通過誘變選育方法得到所需要的菌株，例如從不同地區(qū)的土壤篩選得到30余株可以轉(zhuǎn)化甘油生產(chǎn)二輕基丙酮的菌株；自然選育可以保持菌株的穩(wěn)定性，達(dá)到純化菌種的目的，但一般產(chǎn)量較低，不能滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求，為了提高菌種生產(chǎn)能力，還得進(jìn)一步依靠誘變和分子手段。二是以已有的菌株包括保藏菌株為出發(fā)菌株，通過誘變選育方法得到所需要的菌株，釆用紫外線和6Co射線對G??進(jìn)行復(fù)合誘變選育，篩選到一株耐甘油濃度高，轉(zhuǎn)化效率高的變異菌株。自然篩選一般都選擇土壤作為菌種蹄選材料來源，自然界土壤中蘊藏著豐富的微生物資源，土壤中棲息的大量微生物菌群已經(jīng)成為分離各種抗生素、氨基酸、酶、生理活性物質(zhì)等產(chǎn)生菌分離蹄選的主要材料來源。?

發(fā)明內(nèi)容

為克服上述技術(shù)問題，我們提出了以下技術(shù)方案：?

一種通過復(fù)合誘變對DHA菌株進(jìn)行選育的方法，步驟如下：選擇初始目的菌株；然后在新鮮的斜面上進(jìn)行菌種栽植；制備細(xì)菌懸液，要求其PH保持堿性；然后對其紫外誘變以及化學(xué)誘變；通過平板進(jìn)行分離，是菌落富集；再對其進(jìn)行篩選，對于正突變的變異菌株，立即進(jìn)行低溫保藏。

本發(fā)明中，?其中培養(yǎng)基中，需要加入一定濃度的KH2PO4。?

本發(fā)明中，斜面保藏培養(yǎng)基中，葡萄糖與碳酸鈣溶液的質(zhì)量濃度比為5:1??

本發(fā)明的有益效果是，條件穩(wěn)定，操作簡易，純度較高，可以得到轉(zhuǎn)化效率高的變異菌株。

具體實施方式

一種通過復(fù)合誘變對DHA菌株進(jìn)行選育的方法，步驟如下：選擇初始目的菌株；然后在新鮮的斜面上進(jìn)行菌種栽植；制備細(xì)菌懸液，要求其PH保持堿性；然后對其紫外誘變以及化學(xué)誘變；通過平板進(jìn)行分離，是菌落富集；再對其進(jìn)行篩選，對于正突變的變異菌株，立即進(jìn)行低溫保藏。?

其中培養(yǎng)基中，需要加入一定濃度的KH2PO4。?

斜面保藏培養(yǎng)基中，葡萄糖與碳酸鈣溶液的質(zhì)量濃度比為5:。?

以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。?