[發明專利]雞傳染性喉氣管炎病毒的雞胚培養方法無效

申請號：	201310570209.7	申請日：	2013-11-16
公開（公告）號：	CN103614343A	公開（公告）日：	2014-03-05
發明（設計）人：	魏鎖成;鞏轉娣;張繼瑜	申請（專利權）人：	魏鎖成;鞏轉娣;張繼瑜
主分類號：	C12N7/00	分類號：	C12N7/00;C12R1/93
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	730030 甘***	國省代碼：	甘肅;62
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摘要：
搜索關鍵詞：	傳染性氣管炎病毒培養方法
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【權利要求書】：

1.本技術發明“雞傳染性喉氣管炎病毒的雞胚培養方法”，包括以下步驟：

將雞傳染性喉氣管炎病毒株用病毒稀釋液（稀釋液為每lmL滅菌生理鹽水含鹽酸環丙沙星l0μg）進行5倍稀釋，作為原液；再按10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5的梯度稀釋，然后把5個梯度稀釋的0.2mL病毒液經絨毛尿囊膜，分別接種于10日齡SPF雞胚。

2.以及雞胚在數字智能化孵化機中37℃、56%相對濕度下孵化，3h翻蛋一次；48小時棄去死亡雞胚，觀察至148小時，詳細記錄死亡與存活數；無菌收集72～148小時死亡雞胚，3500r/min離心20?min，取上清液，用于下次傳代培養，共傳3代；無菌收集72～148小時死亡雞胚，將發生病變的尿囊液及絨毛尿囊膜置于組織研磨器中，逐漸加入尿囊液，充分研磨，4000r/?min離心30?min，取上清液，即為ILTV病毒液（種子液），-20℃保存。

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