[發明專利]可用于治療銀屑病的小RNA及其衍生物和藥物制劑

無效

• 申請號: 201310567383.6
• 申請日: 2013-11-14
• 公開（公告）號: CN103736102A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 黃兵;殷勤偉;張洪杰
• 申請（專利權）人: 黃兵
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/113;C12N15/63;A61P17/06
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 鄭自群

技術領域

本發明涉及基因藥物領域，特別是指可用于治療銀屑病的的小RNA及其衍生物和藥物制劑。?

背景技術

銀屑病，又名牛皮癬，是一種慢性感染性皮膚失調證，患病率占世界人口的1～3％。1984年我國24個省、市、自治區進行流行病學調查，其患病率為0.123％，約占皮膚科門診的5～6％。?

患者病變皮膚處出現無傳染性紅色浸潤斑，邊界明顯，其角質細胞異常增生和異常分化并導致表皮增生，同時伴有淋巴細胞滲透和表皮血管擴張、蔓延的特征。?

至今人們對銀屑病發病機制的認識仍非常有限，通常認為是人體免疫細胞的復雜調控網絡和炎癥細胞因子相互作用的結果。易感個體在誘發因素的作用下，凋亡細胞釋放的自身DNA和自身RNA與銀屑病皮損中過度表達的抗菌肽LL37結合形成復合體，誘發漿細胞樣樹突狀細胞激活，通過產生Th1型細胞因子誘導T細胞向Th1型細胞增殖分化。漿細胞樣樹突狀細胞特異性亞型可產生TNF-α及促進一氧化氮合酶產生。活化的樹突狀細胞移行進入引流淋巴結，初始T細胞在IL-12和IL-23的作用下樹突狀細胞刺激分化成為Th1和Th17型效應細胞，經體液循環回流移行進入皮膚組織。T細胞產生大量的TNF-α、IFN-γ、IL-17等細胞因子，刺激角質形成細胞增生活化，產生一系列趨化因子和細胞因子誘導促炎癥活動。其結果導致皮膚內出現大量炎癥細胞的浸潤，表皮角質形成細胞的過度增殖，真皮乳頭微小血管的過度增生，臨床上逐漸出現銀屑病典型的皮疹—-鱗屑性紅斑。在銀屑病樣皮膚病灶中表達的細胞因子主要是Th-1和Th-17免疫細胞亞型分泌的，并且主要增加促炎癥反應細胞因子，如腫瘤壞死因子-α，干擾素-γ，白介素-1，白介素-2，白介素-12，白介素-17，白介素-23，以及粘合素-LFA-1。雖然這些促炎癥細胞因子并不見得是銀屑病的根本原因，但它們在維持銀屑病皮膚病灶的炎癥方面起著關鍵性的作?用。因此降低或抑制一個或數個促炎癥細胞因子的表達是治療銀屑病的一個頗有希望的策略。?

不久前人們通過人源化抗體的技術方法，研究發現針對一個或幾個促炎癥因子的單克隆抗體，能夠有效地治療某些銀屑病病人，其中研究比較多的是針對TNFα的單克隆抗體，其商品名有infliximab和adalimumab，這種抗體通過直接結合TNFα蛋白從而抑制TNFα效應基因，達到臨床治療銀屑病的效果。IL-12/23抑制劑(烏司奴單抗)等新的高選擇性生物制劑在國外也已被批準用于治療銀屑病。為此有報道研究通過小RNA干擾技術直接沉默TNFα的表達，實驗研究表明對人銀屑病的動物模型也具有一定的治療作用。然而單純的針對某一個銀屑病致病細胞因子的治療存在著停藥治療后病情反彈等副作用。因此急需選取新的，對銀屑病致病細胞因子進行新靶點的新型藥物的研發。?

在對小分子的藥物活性篩選研究中發現針對p38MAPK通路的蛋白激酶抑制劑小分子化合物能夠有效的用于銀屑病的治療，但由于其毒性大，所以這類藥物除了用于某些腫瘤的治療外，在銀屑病等慢性疾病的治療中一直沒能進入二期臨床。由于小分子藥物的毒性有多種原因，如小分子作用靶點不專一，小分子化合物的代謝產物具有毒性等原因，選取p38?MAPK通路中的調控基因作為銀屑病的基因治療靶點仍具有可行性。近年來對銀屑病病理學的研究進一步佐證了這一點。Yu?XJ等和Funding?AT等分別報道在銀屑病人的病理組織p38的磷酸化要比正常組織中高出2倍左右，同時在該通路上的MEK，ERK1/2和CREB1的磷酸化也比正常對照組顯著提高。沉默MSK1，MSK2能夠抑制CREB1的表達，同時敲除MSK1還能夠有效的降低和銀屑病直接相關的免疫分子的表達，如IL-6，IL-8和TNFα.然而上述研究并沒有闡明CREB1基因的敲除是否能夠同樣抑制細胞因子TNFα等的表達。?

近年發展起來的小RNA干擾技術為銀屑病治療的基因藥物研發帶來新的發展機會。干擾小RNA是一類長度為20個堿基的能與基因的mRNA互補，經過Dicer-Ago2復合物能使mRNA降解的一類天然或合成小RNA。小RNA藥物的特點是靶點的特異性強，降解產物沒有毒性，是當前新藥研究的一個新的突破點。本發明就是在選擇銀屑病的新靶點的基礎上，結合小RNA的設計?技術和小RNA的透皮傳遞技術，對銀屑病的小鼠模型進行治療，以發現新的高效、低毒的治療銀屑病的潛在小RNA藥物。?

發明內容