[發明專利]一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201310563498.8
• 申請日: 2013-11-14
• 公開（公告）號: CN103636492A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 李志斌;張鐵石;蔣淑磊;徐立軍;白霄霞;李振勤;徐秋良;孫春峰;姜貴平;張文芝
• 申請（專利權）人: 石家莊市農林科學研究院;石家莊市神州花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 石家莊匯科專利商標事務所 13115
• 代理人: 王琪

技術領域

本發明涉及一種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，屬于植物栽培技術領域，主要用于高山杜鵑新品種的大批量繁育。?

背景技術

高山杜鵑粉金蝶(Rhododendron?hybrides“Cosmopolitan”)為杜鵑科杜鵑屬的雜交栽培品種，常綠灌木和小喬木，花粉紅色，邊緣褪為粉白色，帶有一個褐色的大紅斑，植株茂密，株型舒展，葉綠色光亮，耐寒且耐熱，-23℃不落葉，抗病力強，具極高的觀賞價值。高山杜鵑繁殖方法應用播種繁殖、扦插繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖等繁殖方法，但是這些技術受季節、母株材料等很多因素限制，成活率極低，很難進行規?；a。高山杜鵑組織培養只涉及到馬纓杜鵑（Rhododendron?delavayi?Franch）、小葉杜鵑(Rhododendron?Parvifolium?Adoms)、牛皮杜鵑(Rhododendron?Chrysantiuum?pall)等幾個品種，國內外尚未報道高山杜鵑粉金蝶組織培養整個繁殖體系的研究。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種不受外界自然環境限制的高山杜鵑粉金蝶組織培養方法，以提高繁殖速率和商業價值型。?

這種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，包括如下步驟：?

A、外植體處理：選取健壯無害的高山杜鵑粉金蝶帶芽莖段為外植體，先用75%的酒精浸泡30s，無菌水沖洗3次后，再用0.1%升汞進行滅菌3min，無菌水沖洗3次；?

B、啟動培養：將滅菌處理的外植體接種到啟動培養基，白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養時間30天；?

上述的啟動培養基以Read培養基為母液，見附表1。添加IBA0.2mg/L，TDZ0.5mg/L，蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L，調pH=5.3，經過121℃高壓滅菌20min后備用。?

C、叢生芽培養：將啟動培養生長的無菌苗轉接到叢生芽培養基，白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養時間75天；?

D、壯苗培養：將叢生芽培養的無菌苗轉接到壯苗培養基，白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養時間75天；?

E、生根培養：白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養時間90天。?

所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，步驟D所述壯苗培養基以WPM培養基為母液，見附表2。添加蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L，調pH=5.3，經過121℃高壓滅菌20min后備用。?

所述的高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，步驟E所述的生根培養基以Anderson培養基為母液，見附表3。添加NAA0.2mg/L，IBA?0.2mg/L，蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L，pH=5.3，經過121℃高壓滅菌20min后備用。?

本發明而利用組織培養繁殖方法研究高山杜鵑粉金蝶，不受時間和季節環境的變化，并且大大提高繁殖速率，提高高山杜鵑粉金蝶的觀賞價值和商業價值。對保護優異種質資源、挖掘創造新種質有著重大意義，應用前景十分廣闊。?

具體實施方式

下面結合具體實例詳細說明本發明的方法步驟，?

所述高山杜鵑粉金蝶品種09年11月份從比利時根特引進，之后在石家莊市農林科學研究院馴化近4年，這種高山杜鵑粉金蝶組培快速繁殖方法，包括如下步驟：?

A、外植體處理：選取健壯無害的高山杜鵑粉金蝶帶芽莖段為外植體，先用75%的酒精浸泡30s，無菌水沖洗3次后，再用0.1%升汞進行滅菌3min，無菌水沖洗3次；?

B、啟動培養：將滅菌處理的外植體接種到啟動培養基，白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強度為50μmol·m-2·s-1，每天光照12h，培養時間30天；?

上述的啟動培養基以Read培養基為母液，見附表1。添加IBA0.2mg/L，TDZ0.5mg/L，蔗糖25mg/L，瓊脂6.5mg/L，調pH=5.3，經過121℃高壓滅菌20min后備用。?

C、叢生芽培養：將啟動培養生長的無菌苗轉接到叢生芽培養基，白天溫度為25±1℃，夜間22±1℃，光照強度為50μmol·m-2·s-1，?每天光照12h，培養時間75天；?