[發(fā)明專利]快速檢測豬薩佩羅病毒的熒光定量PCR試劑盒及應(yīng)用無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310560789.1 | 申請日: | 2013-11-12 |
| 公開(公告)號: | CN103614493A | 公開(公告)日: | 2014-03-05 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 蘭道亮;陳亞冰;李鍵;吉文匯;孫煥;華修國 | 申請(專利權(quán))人: | 西南民族大學(xué) |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12Q1/06 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 610041 四川省*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 快速 檢測 豬薩佩羅 病毒 熒光 定量 pcr 試劑盒 應(yīng)用 | ||
1.快速定量檢測豬薩佩羅病毒的熒光定量PCR試劑盒,試劑盒包括:
a)RNA裂解液,b)?PrimeScript??RT?Enzyme?Mix?I,c)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液,d)定量引物F及R,?e)?SYBR??Premix?Ex?Taq?II,f)?ROX?Reference?Dye,g)標(biāo)準(zhǔn)陽性模板,h)陰性對照品,i)無菌雙蒸水
????所述逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液含有5×PrimeScript??Buffer,Oligo?dT?Primer,Random?6?mers引物,
標(biāo)準(zhǔn)陽性模板是含有豬嵴病毒特異性目的片段的質(zhì)粒,陰性對照樣品由SPF豬糞便樣品中提取RNA,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA樣品,SYBR??Premix?Ex?Taq?II液含有TaKaRa?Ex?Taq?HS,dNTP?Mixture,Mg2+,Tli?RNaseH,SYBR??Green?I。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薩佩羅病毒熒光定量PCR試劑盒,其特征在于:所述引物為
F:5’-CAGACAAATCAACAACTTTCCAA-3’
R:5’-ATCTAACCAAGACCTACGCAGC-3’。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的定量檢測試劑盒,其特征在于靈敏度達(dá)到70?copies/μL,完全可以滿足薩佩羅病毒的快速檢測及定量的要求。
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