[發(fā)明專利]一種免疫磁性微球的制備方法、以及含有免疫磁性微球的蘇丹紅檢測試劑盒和檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310556986.6
• 申請日: 2013-11-11
• 公開（公告）號: CN104634960A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王琳;田靜秒;王雪;萬渝平;周浩;葉敏;梁恒興;張敏
• 申請（專利權(quán)）人: 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/577
• 代理公司: 隆天知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 72003
• 代理人: 于寶慶;劉春生

1.一種免疫磁性微球的制備方法，包括磁性微球活化的步驟以及磁性微球與抗體或抗原偶聯(lián)的步驟，其特征在于，所述活化和/或偶聯(lián)的步驟中采用以下緩沖液：包含體積百分比為0.01%～0.1%的吐溫-20以及質(zhì)量百分比為0.01%～0.1%的聚乙烯吡咯烷酮的磷酸鹽緩沖液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，所述磷酸鹽緩沖液的濃度為10～20mM，pH值為5.8～6.2；優(yōu)選地，所述磁性微球為表面帶有羧基的磁性微球；所述抗體為蘇丹紅單克隆抗體。

3.一種含有免疫磁性微球的蘇丹紅檢測試劑盒，其特征在于，包括以下組分：

（1）按照權(quán)利要求1或2所述制備方法制得的蘇丹紅單克隆抗體結(jié)合免疫磁性微球；（2）蘇丹紅酶結(jié)合物；（3）樣品稀釋液；（4）蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)品溶液；（5）底物顯色液；（6）終止液；（7）洗滌液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3的試劑盒，其特征在于，所述蘇丹紅酶結(jié)合物為辣根過氧化酶標(biāo)記的蘇丹紅抗原。

5.根據(jù)權(quán)利要求3的試劑盒，其特征在于，所述樣品稀釋液為包含5%～10%體積的甲醇、0.05%～0.1%體積的乳化劑TX-100的0.01～0.02M磷酸鹽緩沖生理鹽水，其pH值為7.2～7.4。

6.根據(jù)權(quán)利要求3的試劑盒，其特征在于，所述蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)品溶液為蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)品溶于所述樣品稀釋液所得的溶液，濃度分別為：0ng/mL、0.2ng/mL、0.6ng/mL、1.8ng/mL和5.4ng/mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求3的試劑盒，其特征在于，所述底物顯色液由A液和B液組成，A液為過氧化脲顯色液，B液為四甲基聯(lián)苯胺顯色液。

8.根據(jù)權(quán)利要求3的試劑盒，其特征在于，所述終止液為1.8～2.0M的硫酸溶液。

9.根據(jù)權(quán)利要求3的試劑盒，其特征在于，所述洗滌液為包含0.1%～0.5%體積的吐溫-20的10～20mM磷酸鹽緩沖生理鹽水，其pH值為7.0～7.4。

10.一種蘇丹紅的檢測方法，其特征在于，采用權(quán)利要求3-9任一項所述的試劑盒檢測待測樣品中的蘇丹紅。