[發明專利]褐藻膠寡糖的應用

無效

• 申請號: 201310556900.X
• 申請日: 2013-11-11
• 公開（公告）號: CN103565817A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 續旭;畢德成;魏高斌;李超;吳小婷;萬敏
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: A61K31/702
• 分類號: A61K31/702;A61K31/734;A61K31/7016;A61P31/04;A61P31/12;A61P35/00;A23L1/29;C12P17/00;C12P19/00;C12P19/04;C12P19/12
• 代理公司: 深圳市恒申知識產權事務所(普通合伙) 44312
• 代理人: 陳健

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及褐藻膠寡糖用于制備促進巨噬細胞吞噬活性的藥物和保健品的新應用。

背景技術

褐藻膠是由互為C5差向異構體的兩種單體——甘露糖醛酸和古羅糖醛酸相互嵌合而成的線性大分子。寡糖是由2-10個單糖經脫水縮合形成糖苷鍵連接成直鏈或支鏈的低聚糖，其水溶性好，易被吸收。褐藻膠寡糖具有抗氧化、抗凝血、降血脂等多種生物活性，但尚未發現褐藻膠寡糖用于促進巨噬細胞吞噬活性。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供褐藻膠寡糖制備促進巨噬細胞活性藥物和保健品的新應用，所述褐藻膠寡糖制備的藥物和保健品能有效促進巨噬細胞的吞噬微生物的活性。

本發明所采用的技術方案為：提供褐藻膠寡糖的應用，將所述褐藻膠寡糖用于制備促進巨噬細胞吞噬活性的藥物或保健品。

進一步地，所述褐藻膠寡糖為褐藻酸鈉經褐藻膠裂解酶酶解制得。

進一步地，將所述褐藻膠寡糖用于制備抗腫瘤的藥物或保健品。

進一步地，將所述褐藻膠寡糖用于制備抗菌的藥物或保健品。

進一步地，將所述褐藻膠寡糖用于制備抗病毒的藥物或保健品。

本發明的有益效果在于：本發明首次發現褐藻膠酶解寡糖具有可促進巨噬細胞吞噬活性的作用，并提供將褐藻膠酶解寡糖用于制備促進巨噬細胞活性的應用。本發明大量試驗結果表明，褐藻膠酶解寡糖作用于巨噬細胞可促進其活性，提高其對外來微生物的吞噬及殺傷能力，將褐藻膠寡糖用于制備促進巨噬細胞活性的藥物或保健品具有廣闊的前景。

附圖說明

圖1是褐藻膠酶解寡糖對THP-1細胞吞噬能力的影響圖；

圖2是褐藻膠酶解寡糖對經IgG調理及未經IgG調理的THP-1細胞吞噬作用的影響圖；

圖3是激光共聚焦顯微鏡所觀察到的RAW264.7細胞骨架結構圖（注：圖3A為陰性對照Ctrl組；圖3B為GOM處理組；圖3C為PG處理組）；

圖4是實施例3中不同處理組RAW264.7細胞長寬比變化圖；

圖5是實施例3中不同處理組RAW264.7細胞面積變化圖；

圖6是實施例3中不同處理組RAW264.7細胞的熒光強度變化圖；

圖7是褐藻膠酶解寡糖作用于THP-1細胞影響吞噬金黃色葡萄球菌存活率的變化圖；

圖8為褐藻膠酶解寡糖作用于RAW264.7細胞影響吞噬金黃色葡萄球菌存活率的變化圖；

圖9是實施例6褐藻膠酶解寡糖作用于小鼠腹水上清液中菌落數比較圖；

圖10是實施例6褐藻膠酶解寡糖作用于小鼠腹水貼壁細胞的吞噬菌落數比較圖。

具體實施方式

為了使本發明所要解決的技術問題、技術方案及有益效果更加清楚明白，以下結合附圖及實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

實施例1?褐藻膠寡糖的制備

將褐藻酸鈉經HCl水解分級，通過調pH至2.85，得到純度較高的聚甘露糖醛酸（PM）和聚古羅糖醛酸（PG）。分別加入適量的褐藻膠裂解酶，于37℃恒溫反應過夜，通過加熱終止酶解反應后，冷卻酶解液，用0.45μm濾膜過濾，凍干備用。PM的酶解產物為甘露糖醛酸寡糖混合物，簡稱MOM；PG的酶解產物即古羅糖醛酸寡糖混合物，簡稱GOM。

實施例2?褐藻膠寡糖直接抑菌作用測試

采用瓊脂擴散法中的打孔法，通過觀察抑菌圈的大小來考察褐藻膠寡糖的抑菌效果。配制濃度分別為0.1%、0.5%、1%的MOM、GOM三種樣品溶液，用無菌水作為空白對照，用氨芐青霉素作為陽性對照。取500μl活化菌液（菌種選?。航瘘S色葡萄球菌（G⁺）和大腸桿菌（G^-））加入到100ml滅菌的LB培養基中，迅速搖勻后倒入培養皿中，同時用打孔器打孔。待培養基冷卻凝固后，取微量培養基均勻的鋪在洞孔底部。取100μl各樣品溶液加樣于洞孔中，置于37℃培養箱中培養24h后觀察抑菌圈檢測抑菌效果。

測量抑菌圈，見表1，褐藻膠酶解寡糖MOM和GOM對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌都沒有產生明顯的抑菌圈，所以都沒有直接體外抑菌活性。

表1褐藻膠寡糖對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的作用觀察

P.C.代表陽性對照（氨芐青霉素）.N.D.代表未觀察到.

實施例3褐藻膠酶解寡糖促進巨噬細胞的吞噬作用