[發(fā)明專利]抗病促生的綠針假單胞菌劑的制備方法與用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310552337.9
• 申請日: 2013-11-07
• 公開（公告）號: CN104017744A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 彭華松;張平原;張雪洪;王威;胡洪波
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C05F11/08;C12R1/38
• 代理公司: 上海漢聲知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236
• 代理人: 牛山;陳少凌

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥和生物肥料領(lǐng)域，涉及防病促生的微生物制劑的制備方法及應用；具體涉及一種抗病促生的綠針假單胞菌劑的制備方法與用途。?

背景技術(shù)

聯(lián)合國糧農(nóng)組織的研究結(jié)果表明，農(nóng)作物病蟲害自然損失率在37％以上，嚴重影響糧食安全和環(huán)境生態(tài)的安全。據(jù)調(diào)查，我國常見農(nóng)作物的病害生物達1600種，每年造成近1000億人民幣的損失，嚴重地阻礙了我國農(nóng)業(yè)的發(fā)展。目前，由于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中各種化學農(nóng)藥的大量使用，很多種類的病蟲害已經(jīng)對這類藥物產(chǎn)生了嚴重的耐藥性，導致防治效果不斷降低。據(jù)報道，十年來我國爆發(fā)的病蟲害種類增加一倍以上。同時，一些農(nóng)藥不同程度地殘留在土壤、植物和水體中，對人體健康造成了潛在的威脅。我國許多農(nóng)副產(chǎn)品出口國外時，常常因為農(nóng)藥殘留超標而遭遇國外的“綠色壁壘”封殺，每年的損失高達百億美元，引起了全社會的廣泛關(guān)注。?

在農(nóng)作物浸染性病害中，主要有真菌性病害、細菌性病害、病毒性病害和線蟲病害等。其中，真菌病害是目前已知植物病害中種類最多的病害，約占病害種類的80％-90％；且真菌病害可以出現(xiàn)在植物的各個部位，癥狀類型也最多。?

水稻紋枯病又稱云紋病，俗名花足稈、爛腳瘟、眉目斑。是由立枯絲核菌(Rhizoctonia?solani)感染得病，多在高溫、高濕條件下發(fā)生。在亞洲、美洲、非洲種植水稻的國家普遍發(fā)生。我國各稻區(qū)均有分布，但在南方稻區(qū)為害最嚴重，引起結(jié)實率和千粒重顯著降低，甚至植株例伏枯死，是當前水稻生產(chǎn)上的主要病害之一。由于發(fā)生面積廣、流行頻率高，其所致?lián)p失往往超過稻瘟病。?

西瓜枯萎病又稱蔓割病、萎凋病，其病原為鐮刀菌(Fusarium?oxysporum?f.sp.niveum)，屬于半知菌類的真菌，歸屬于叢梗孢目，瘤座孢科在土壤中存活時間可達10年之久。西瓜自幼苗期到成株期均可發(fā)病，但發(fā)病的高峰時期是開花座果期。近年來，我國西瓜枯萎病發(fā)生嚴重，造成西瓜大量減產(chǎn)，一般病田減產(chǎn)30％～40％，重病田則可減產(chǎn)80％以上甚至絕收，給西瓜生產(chǎn)造成嚴重的經(jīng)濟損失。?

終極腐霉(Pythium?ultimum?Trow)最初從英國腐敗的水芹幼苗上分離出，目前報?道分布甚廣，它不僅棲息在土壤中，還廣泛侵染大豆、菜豆、豌豆、甘薯、松苗、咖啡、蘋果、柑橘、桃、棉花、菊花、大麗花、南瓜、西瓜、甘蔗、苜蓿、番茄等150余種經(jīng)濟植物，引起苗枯，猝倒、根腐、腳腐、枯萎等多種病害。?

植物根際促生細菌(plant?growth-promoting?rhizobacteria,PGPR)是一群定植于植物根際、與植物根密切相關(guān)的根際細菌。大量溫室和大田試驗結(jié)果表明，許多PGPR菌株在溫室、大田條件下表現(xiàn)出明顯的促進植物生長、防治土傳病害、提高植物對非生物脅迫的抗逆性、促進土壤生物修復等效果。PGPR是根治作物連作障礙(重茬病)的有效途徑之一。?

假單胞菌是一類廣泛分布于自然界中的革蘭氏陰性細菌，也是植物根際的常見微生物種群。許多假單胞菌能產(chǎn)生鐵載體、抗生素、胞外水解酶和氫氰酸等代謝產(chǎn)物，保護植物免受病原微生物的侵害，誘導植物抗性，同時它也能分泌吲哚類的化合物，促進植物生長。作為植物根際促生細菌，假單胞菌被全世界的科學家廣泛研究。假單胞菌產(chǎn)生的抗生素種類很多，包括硝吡咯菌素(prorolnitrin，Prn)，吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylic?acid，PCA)，2,4-二乙酰藤黃酚(2,4-diacetylphloroglucinol，DAPG)，藤黃綠菌素(pyoluteorin，Plt)，綠膿菌素(pyocyanin，PYO)，脂多肽等。吩嗪類化合物可以作為電子載體，消耗細胞里面的NAD(P)H等還原性物質(zhì)，同時產(chǎn)生活性氧(reactive?oxygen?species，ROS)，使靶細胞中毒死亡。因此吩嗪類化合物具有廣譜的抗真菌活性，而且不易產(chǎn)生耐藥性。由此可見，在大力發(fā)展高效、低毒的化學農(nóng)藥的同時，篩選和應用能分泌吩嗪類化合物的假單胞菌用于農(nóng)作物真菌性病害的防治是一條經(jīng)濟的、有利于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的有效途徑。?

發(fā)明內(nèi)容