[發(fā)明專利]一種金雀花堿的提取分離方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310549873.3
• 申請日: 2013-11-07
• 公開（公告）號(hào): CN103588773A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 廖志新;葉潤;紀(jì)蘭菊;孫洪發(fā);胥廉謙;施天一
• 申請（專利權(quán)）人: 東南大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D471/18
• 分類號(hào): C07D471/18
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 沈振濤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥化學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種生物堿的提取分離方法，具體涉及一種金雀花堿的提取分離方法。

背景技術(shù)

金雀花堿，其分子式為C₁₁H₁₄0N₂，分子量為190.24。金雀花堿具有顯著的生物活性，臨床用金雀花堿0.15%的水溶液靜脈注射，搶救因手術(shù)和各種創(chuàng)傷引起的反射性呼吸暫停、休克和新生兒窒息。近期研究表明，金雀花堿還具有抗心律失常、抗微生物感染、抗?jié)円约拜^強(qiáng)的抗癌活性。

現(xiàn)有對金雀花堿提取純化工藝多是傳統(tǒng)工藝。中國專利201010182690.9公開了一種金雀花堿的提取方法，包括CO₂超臨界提取后通過大孔樹脂層析分離、丙酮重結(jié)晶、有機(jī)溶劑提取、酸化萃取、氧化鋁柱或硅膠柱層析、丙酮結(jié)晶等工序，工藝復(fù)雜，操作繁瑣。中國專利201110225551.4公開了披針葉黃華總生物堿和幾種高純度藥用物質(zhì)的分離方法，該發(fā)明以披針葉黃華為原料，通過酸水提取、離子樹脂吸附、大孔樹脂富集得到總生物堿，用高速逆流色譜法和制備液相色譜對總生物堿進(jìn)行分離純化，得到高純度的金雀花堿、黃華堿、鷹爪豆堿和N-甲基金雀花堿，僅能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室小試，難以擴(kuò)大應(yīng)用。中國專利201210315804.1公開了一種牧馬豆中提取金雀花堿的方法，該發(fā)明以牧馬豆為提取原料，用有機(jī)溶劑脫脂后提取，再用硅膠層析分離，最后重結(jié)晶得金雀花堿；然而硅膠層析可能帶來二次污染，且純度并不高。中國專利200910023485.5公開了一種從披針葉黃華種籽中提取金雀花堿和黃華堿的方法，該發(fā)明以披針葉黃華種籽為提取原料，將披針葉黃華種籽粉碎、提取、濃縮得浸膏，再用有機(jī)溶劑萃取浸膏，酸水溶液反萃取、凈化萃取溶劑，同時(shí)得到含黃華堿的酸水溶液，此酸水溶液加入堿性試劑堿化，析晶，重結(jié)晶，可得到黃華堿產(chǎn)品；萃取過的浸膏堿化后用有機(jī)溶液萃取，濃縮，結(jié)晶，重結(jié)晶，可得到純度98%以上的金雀花堿產(chǎn)品；該方法工藝復(fù)雜，收率不高。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：為了解決現(xiàn)有技術(shù)提取分離金雀花堿純度低、成本高、污染重、周期長的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種成本低、純度高、適于工業(yè)應(yīng)用的金雀花堿的提取分離方法。

技術(shù)方案：本發(fā)明提供的一種金雀花堿的提取分離方法，包括以下步驟：

（1）提取：將牧馬豆種子粉碎，加4-10倍質(zhì)量的有機(jī)溶劑水溶液，回流提取1-4h，提取液濃縮至質(zhì)量濃度為0.5～1.5g/ml，得到濃縮液；

（2）大孔樹脂聯(lián)用分離：

采用孔徑在130-300A°、比表面積在480-600m²/g的聚苯乙烯型非極性樹脂一次分離：將濃縮液調(diào)pH至8-9，加至大孔樹脂柱上靜置吸附；依次用5-10倍柱體積的純化水、5-10倍柱體積的10%-40%的乙醇水溶液洗脫，乙醇洗脫液濃縮至質(zhì)量濃度為0.5-1.5g/ml，得一次分離濃縮液；

采用孔徑在50-80A°、比表面積在800-1100m²/g的聚苯乙烯型非極性樹脂二次分離：將一次分離濃縮液調(diào)pH至8-9，加至大孔樹脂柱上靜置吸附；依次用4-6倍量柱體積的純化水、4-6倍量柱體積的10%乙醇、5-10倍量柱體積的15-25%乙醇洗脫，收集15-25%乙醇洗脫液，濃縮、干燥，得固體；

（3）重結(jié)晶：將步驟（2）得到的固體在溶劑中重結(jié)晶，即得。

其中，步驟（1）中，牧馬豆種子粉碎至10-60目；所述有機(jī)溶劑為乙醇或甲醇，有機(jī)溶劑水溶液的質(zhì)量百分比濃度為35%-95%。

其中，步驟（2）中，一次分離所使用的聚苯乙烯型非極性樹脂為X-5型大孔樹脂或AB-8型大孔樹脂。

其中，步驟（2）中，大孔樹脂在使用前還需要進(jìn)行預(yù)處理，方法為：用高于樹脂層10-20厘米的乙醇浸泡3-4小時(shí)后放凈乙醇洗滌液，用相同方法反復(fù)洗滌至乙醇洗滌液在試管中加3倍量水不顯渾濁，再用清水洗滌至無乙醇味。

其中，步驟（2）中，一次分離條件：上樣量為0.01-0.2倍柱體積，靜置吸附時(shí)間為10-50分鐘，洗脫速度為1-5mL/min。

其中，步驟（2）中，二次分離所使用的聚苯乙烯型非極性樹脂為DM18型大孔樹脂或DM2型大孔樹脂。

其中，步驟（2）中，二次分離條件：上樣量為0.01-0.2倍柱體積，靜置吸附時(shí)間為20-40分鐘，洗脫速度為1-3mL/min。

其中，步驟（3）中，溶劑為甲醇、乙醇、乙醚或丙酮；固體與溶劑的用量比為1g：（1-10）ml。