[發(fā)明專利]一種木瓜蛋白酶的提純方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310549707.3 | 申請日： | 2013-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN103602649A | 公開（公告）日： | 2014-02-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陸祥;陸超雄;何維 | 申請（專利權(quán)）人： | 陸祥 |
| 主分類號： | C12N9/50 | 分類號： | C12N9/50 |
| 代理公司： | 廣州市越秀區(qū)哲力專利商標事務(wù)所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 湯喜友 |
| 地址： | 510000 廣東省廣州市番禺區(qū)化龍*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 木瓜蛋白酶 提純 方法 | ||
1.一種木瓜蛋白酶的提純方法,?其特征在于包括如下步驟：
1）往木瓜漿中加入水，攪拌均勻，得到木瓜漿溶液，然后調(diào)節(jié)木瓜漿溶液的pH值為6-7;
2）添加復(fù)合酶Extyme-A：按木瓜漿重量的0.2-0.6%添加復(fù)合酶Extyme-A到木瓜漿溶液中，攪拌反應(yīng)5小時；所述復(fù)合酶Extyme-A由按酶活力計的以下原料混合制備而成：果膠酶8000U/g、α-淀粉酶2000U/g、β-葡聚糖酶25000U/g;
3）板框過濾：將經(jīng)過步驟2）處理后的木瓜漿溶液進行板框過濾，過濾壓力控制在0.6-0.8MPa，收集濾液；?
4）離心：將步驟3）收集到的濾液進行沉降離心，收集離心液；
5）添加復(fù)合酶Extyme-B：按離心液重量的0.1%-0.2%添加復(fù)合酶Extyme-B到離心液中;攪拌至酶完全溶解，混合均勻;所述復(fù)合酶Extyme-B由按酶活力計的以下原料混合制備而成：堿性蛋白酶50000U/g、果膠酶6000U/g;
6）粗濾:?將經(jīng)過步驟5）處理后的離心液采用聚偏氟乙烯濾膜進行過濾，聚偏氟乙烯濾膜的孔徑為0.22um，操作壓力0.1MPa；?
7）精濾:?將經(jīng)過步驟6）粗濾后的料液采用聚砜超濾膜進行過濾濃縮，聚砜超濾膜的截留分子量為10K，操作壓力0.1MPa；得到木瓜蛋白酶濃縮液；?
8）真空干燥：將步驟7）得到的木瓜蛋白酶濃縮液進行抽真空干燥，得到木瓜蛋白酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的木瓜蛋白酶的提純方法，其特征在于:?在步驟1）中，所述木瓜漿與水的重量比為1：5，水溫控制在25-35℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的木瓜蛋白酶的提純方法，其特征在于:按木瓜漿重量的0.4-0.6%添加復(fù)合酶Extyme-A到木瓜漿溶液中。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的木瓜蛋白酶的提純方法，其特征在于:在步驟2）中，按木瓜漿重量的0.5%添加復(fù)合酶Extyme-A到木瓜漿溶液中。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的木瓜蛋白酶的提純方法，其特征在于:在步驟4）中，控制轉(zhuǎn)速為1500rpm，離心時間為25-30分鐘。
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