[發明專利]番茄環斑病毒快速檢測盒

無效

• 申請號: 201310547816.1
• 申請日: 2013-11-07
• 公開（公告）號: CN103558378A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 李鑫;曹冬梅;曹際娟;于娟娟
• 申請（專利權）人: 李鑫;曹冬梅;曹際娟;于娟娟
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，具體涉及一種用免疫層析技術檢測植物番茄環斑病毒感染的裝置。?

背景技術

番茄環斑病毒(tomato?ring?spot?virus,ToRSV)是檢疫性病毒病害之一，是線蟲傳多面體組成員，可感染105屬157種草本和木本植物，主要感染果樹和漿果作物，屬我國對外檢疫的一類檢疫性有害生物。ToRSV的檢測方法主要有生物學、血清學和電鏡技術，ELISA和PCR是應用最多的兩種檢測ToRSV的技術。但是上述技術普遍存在著對人員、環境要求高的問題，難以進行現場快速檢測。免疫層析技術是上世紀90年代發展起來的一種基于抗原抗體反應的簡便快速檢測技術，該技術已經廣泛應用于臨床、食品安全檢測領域。膠體金免疫層析檢測試紙條是體外快速檢測試劑的主要品種之一。以其快速、簡便、價廉、所用樣品量少、可以直接測定未經處理的樣品、污染小、不需要貴重儀器、可以直觀判斷結果、易于基層和現場使用等優點，而得到廣泛應用。但是膠體金免疫層析試紙條的靈敏性不夠理想，這大大限制了它在檢測領域中的廣泛應用。?

采用比納米金顆粒信號更為強的標記物質即可在一定程度上提高免疫層析試紙條的靈敏性。新型的熒光納米顆粒恰恰具有這樣一種優勢。熒光納米顆粒是將熒光物質（如FITC、量子點、稀土螯合物）包裹在高分子材料中，形成納米顆粒（Nanoparticles，NPs）。包裹作用一方面能使更多的發光分子連接在生物分子上起到信號放大作用，另一方面可克服外界環境對發光試劑的影響(如淬滅作用等)，增加發光試劑的穩定性。包裹著熒光分子或其它發光分子的納米顆粒比單個熒光分子有高得多的發光強度和光化學穩定性。熒光納米顆粒還具有顆粒均一，大小任意可調等優勢；尤其是在標記方面，完全摒棄了膠體金依靠被動物理吸附的標記方式，采用定向共價偶聯技術，幾乎完整保持了抗體和抗原的活性，使檢測的背景噪音大大降低。采用相同的抗原和抗體試劑，熒光納米顆粒在靈敏性上可以輕易超出膠體金1-2個數量級，是極有應用前景的生物分子標記材料。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種使用方便，靈敏度高的針對番茄環斑病毒快速檢測裝?置，用于植物番茄環斑病毒感染的現場快速檢測。?

本發明公開一種番茄環斑病毒快速檢測盒，包括盒蓋、盒身和試紙條，盒蓋上設置用于收納熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物的反應槽，盒身內設置試紙條收納位；所述的試紙條是番茄環斑病毒快速檢測試紙條，由底板和附著在底板上依次緊密相接的樣品墊、層析膜和吸水墊組成，所述的層析膜上設有檢測區和質控區，檢測區固定與番茄環斑病毒發生特異性反應的單克隆抗體或多克隆抗體。所述番茄環斑病毒快速檢測盒的形式更有有益于產品的保存和使用，檢測時熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物與檢測樣品充分接觸，更有助于陽性樣品的檢出，并且時間證明有非常高的靈敏度。?

為適用不同情況下的番茄環斑病毒快速檢測，本發明所述的番茄環斑病毒快速檢測盒可制備為各種具體的實施方式。?

為實現多次使用的目的，本發明的番茄環斑病毒快速檢測盒的具體實施方式之一是在所述的盒身內設置試劑瓶收納位，所述的試劑瓶收納位放置收納了熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物的棕色試劑瓶。試劑瓶中預先灌入可供多次使用量的熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物反應液。使用時，向反應槽中倒入一次檢測量的反應液，即可進行后續檢驗。為了避免所述熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物的失活，該實施方式下的番茄環斑病毒快速檢測盒需要于4℃度保存。?

為應用于多個樣品檢測目的，本發明的番茄環斑病毒快速檢測盒的另一具體實施方式是在所述檢測盒中配置具孔反應板，所述具孔反應板上設有用于容納熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物的盲孔。作為優選地，所述的具孔反應板從整體外型上與盒身反應槽相匹配，具孔反應板上設有多個孔徑0.5～1.0cm、深度0.5～1.0cm的盲孔。所述的熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物可以采用上文述及的試劑瓶方式保存，使用時加入到具孔反應板的盲孔中。更為優選地，是在盲孔中預先吸附凍干的熒光納米顆粒-番茄環斑病毒抗體偶聯物。檢測過程中，將具孔反應板取出放置于反應槽中，并以每一個盲孔作為一個獨立的展開槽進行加樣檢測。可實現同時對對多個樣品的檢測。?

上述各個技術特征，也可以在番茄環斑病毒快速檢測盒的設計中組合使用，其組合而成的技術方案也應當在本發明所延及的范圍內。?