[發明專利]從血液中分離高純度循環腫瘤細胞的方法

有效

• 申請號: 201310547812.3
• 申請日: 2013-11-06
• 公開（公告）號: CN103642756A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 施奇惠;鄧宇亮;孫帥;張瑜
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 楊元焱

技術領域

本發明涉及生物與醫學檢測，涉及一種從混合細胞群體中分離高純度稀有細胞的方法，特別涉及一種從血液中分離高純度循環腫瘤細胞的方法。

背景技術

稀有細胞是指生物樣本中存在的數量稀少卻具有重要生物學功能或臨床檢測意義的細胞，如人外周血中的循環腫瘤細胞、循環內皮細胞、被病毒感染的細胞，以及實體腫瘤中的腫瘤干細胞等。由于稀有細胞數量極其稀少，對其檢測猶如大海撈針，而對其進一步的分析就更加困難，因此急需發展能夠高效、快速的將稀有細胞從復雜生物樣本中分離出來的方法與工具。

人外周血中的循環腫瘤細胞(CTC)是一類具有代表性的稀有細胞，它是指自發或因診療操作由腫瘤病灶播散進入外周血循環的腫瘤細胞，并在一定條件下可發展為腫瘤轉移性病灶(Racila?E，Euhus?D，Weiss?AJ，et?al.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998，95，4589-4594；Pantel?K，Brakenhoff?RH，Nat.Rev.Cancer2004，4，448-456；Zhe?XN，Cher?ML，Bonfil?RD，Am.J.Cancer?Res.2011，1，740-751；Butler?TP，Gullino?PM，Cancer?Res.1975，35，512-516)。由于超過90％的癌癥死亡是由轉移造成的(MehlenP，Puisieux?A，Nat.Rev.Cancer2006，6，449-458)，而循環腫瘤細胞是腫瘤轉移灶的直接來源(Dawood?S，Cristofanilli?M，Curr.Treat?Options?Oncol.2007，8，89-95；Fidler?IJ，Nat.Rev.Cancer2003，3，453-458)，因此從血液中檢測循環腫瘤細胞越來越引起人們的重視。目前已有證據顯示檢測外周血中的循環腫瘤細胞數目可用于實體瘤患者的預后以及預測化療的有效性，包括乳腺癌(Cristofanilli?M，Budd?T，?Ellis?MJ，et?al.N.Engl.J.Med.2004，351，781-791；Smerage?JB，Hayes?DF，Cancer?Invest.2008，26，109-114)、前列腺癌(Moreno?JG，Miller?MC，Gross?S，et?al.Urology2005，65，713-718；De?BonoJS，Scher?HI，Montgomery?RB，et?al.Clin.Cancer?Res.2008，14，6302-6309；Scher?HI，Jia?XY，De?Bono?JS，et?al.Lancet?Oncol.2009，10，233-239)、結腸癌(Sastre?J，Maestro?ML，Puente?J，et?al.Ann.Oncol.2008，l9，935-938)、腎細胞癌(Bluemke?K，Bilkenroth?U，Meye?A，et?al.Cancer?Epidemiol.Biomarkers?Prev.2009，18，2190-2194)，黑色素瘤(Palmieri?G，?Satriano?SM，Budroni?M，et?al.BMC?Cancer.2006，6，266；Mocellin?S，Hoon?D，Ambrosi?A，et?al.Clin.Cancer?Res.2006，12，4605-4613)等。進一步運用循環腫瘤細胞負荷作為潛在預測指標來指導實體瘤患者的病程分期和復發監控已成為癌癥研究中一個活躍而重要的課題(Pachmann?K，Dengler?R，Lobodasch?K，et?al.J.Cancer?Res.Clin?Oncol，2008，134，59-65)。