[發明專利]幾個強抑制白粉病的新四氫呋喃化合物及應用

無效

• 申請號: 201310547717.3
• 申請日: 2013-10-31
• 公開（公告）號: CN104592174A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 王林
• 申請（專利權）人: 王林
• 主分類號: C07D307/16
• 分類號: C07D307/16;C07D493/08;A01P3/00;C12P17/04;C12P17/16;C12P17/18;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明屬于海洋微生物領域，具體的說是海洋生境鏈霉菌通過人工培養、發酵、提純獲得4個新化合物，還涉及到該化合物作為防治栽培植物白粉病及植物其它病害的應用。該菌種保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址為北京市朝陽區北辰西路3號，中國科學院微生物研究所，保藏日期2011年2月25日，保藏編號CGMCC?No.4607，分類命名Streptomyces?nitrosporus。?

背景技術

近幾年來，國際上對農藥殘留問題日益重視，禁用限用的農藥越來越多、殘留標準不斷提高，每年因化學農藥殘留問題造成中國農產品出口的直接和間接損失巨大，同時隨著中國經濟的發展和人民生活水平的提高，農產品安全問題也受到政府和民眾普遍關注，急需開發高效低毒的新農藥。從天然產物中開發高效低毒的新先導化合物是創制新農藥的關鍵。與其他生物源農藥相比，微生物源農藥以其開發費用低、更容易實現產業化的優勢，成為國內外開發新農藥的首選資源，尋找微生物源的新結構活性物質或已有化合物的新功能是生物農藥創制的重要途徑。?

在已有的植物病害中，白粉病是分布廣、危害重、難防治的病害之一，廣泛寄生于糧食、蔬菜、經濟等栽培植物，每年給農業造成巨大經濟損失，且抗藥性發展迅速，需要不斷開發新農藥，而從已開發的生物資源發現新的農用微生物的機率明顯減少，開發新生境的微生物資源成為解決這一問題的突破口，海洋微生物以其生境特殊，新化合物獲得率高而受到重視。?

由我們經研究測試獲得產生四氫呋喃類化合物適宜的培養條件，發酵物經化學常規方法提取，獲得4個新四氫呋喃類化合物，這4個新四氫呋喃類化合物都對植物白粉病具有強抑制作用，同時也抑制其它植物病原真菌，其中化合物1-3是新化合物，化合物4與Marc?Stadler在2001年報道的cyclo-nonactic?acid的兩種化合物互為C-8差向異構體，從未有人報道這4個新四氫呋喃類化合物具有農藥活性。?

發明內容

本發明的目的是提供四種抑制白粉病和其它植物病原真菌的新四氫呋喃化合物，同時提供產生的海洋生境鏈霉菌菌株制備方法及其應用，充分利用了海洋微生物這一?特殊生境的天然資源，菌株通過人工培養發酵，化學方法提取、純化、結構解析獲得4個新四氫呋喃類化合物，無論離體還是活體都有很好的抑制植物病原真菌的作用。?

本發明的目的是由以下技術方案實現的，研制了幾個強抑制白粉病的新四氫呋喃化合物并在防治植物病害中應用，所述的四氫呋喃化合物產生菌株CQT14-24為海洋生境鏈霉菌Streptomyces?nitrosporeus，通過人工培養方法調節，得到發酵物再經常規化學方法提取，獲得4個新四氫呋喃類化合物，4個新化合物均對白粉菌及多種植物病原菌具有強抑制作用，其特征包括如下步驟：?

1)以其保藏編號為：CGMCC?No.4607的CQT14-24菌株，菌株經培養基優化測試，其發酵培養液的配方為：可溶性淀粉17-25g，燕麥浸汁100-150ml，蛋白胨2-5g，精氨酸1-2g，KNO₃1-3g，K₂HPO₄0.3-0.5g，MgSO₄0.5-1.0g，NaCl，10-15g，KCl0.03-0.05g，MgCl₂0.23-0.50g，FePO₄0.01-0.02g，水650-700ml，pH7.0-7.5，上述為培養液，加瓊脂16-19g為固體培養基；?

2)菌株在上述固體培養基置22℃-25℃溫箱培養5-6天，將固體培養基生長好的菌體刮下，接入步驟1中的培養液培養7天為種子液，再將種子液接入40-50L上述培養液中，22℃-25℃，轉速150rpm，振蕩培養9-10天，獲得發酵物；?

3)發酵物通過XAD-16大孔樹脂吸附，95％乙醇洗脫，濃縮萃取液，將獲得浸膏用硅膠柱中進行色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇為洗脫劑梯度洗脫；?

4)收集10％-80％乙酸乙酯/石油醚洗脫液，經硅膠正相色譜，以洗脫液為10％-50％乙酸乙酯/石油醚洗脫分離，再以ODS反向色譜分離純化，得到4個新四氫呋喃化合物。?

所述的4個新四氫呋喃化合物均為淡黃色油狀物，其結構為butyl-homononactiat?(1)，8-OAc-homonoactic?acid(2)，homononactoyl-nonactic?acid(3)和cyclo-nonactic?acid(4)。?