[發明專利]一種沙棗組織培養方法

有效

• 申請號: 201310547387.8
• 申請日: 2013-11-07
• 公開（公告）號: CN103583361A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 劉力強;宋福強
• 申請（專利權）人: 黑龍江錦繡大地生物工程有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 何強

1.一種沙棗組織培養方法，其特征在于沙棗組織培養按以下步驟進行：

一、采集沙棗當年生枝條，反復沖洗后進行水培，嫩芽長到2～3cm長用剪刀剪下放在燒杯中，燒杯口用紗布蓋住，清水滴澆2h±0.1h，然后取出嫩芽浸入濃度為75%的酒精中45s，再用無菌水沖洗3次，之后放入濃度為6%的NaClO溶液中處理6min，再用無菌水清洗3～5次，吸干水分后無菌操作將嫩芽上的葉片剪除，并將嫩芽的莖剪切成長度為1±0.2cm、帶有節間的莖段，再將莖段接種于不含任何植物激素的MS培養基中，在25℃、每日光照16h、光照強度為2000lux的環境中初始培養10天；

二、選初始培養長出的無菌苗葉的葉柄部分切成0.5cm×0.5cm大小，然后轉移至每升含有0.5mg6-芐氨基嘌呤和1.5mg萘乙酸的MS培養基中25℃培養60天；然后將愈傷塊在無菌條件下切割成0.2cm×0.2cm×0.2cm大小轉移至每升含1.0mg萘乙酸和0.5mg6-芐氨基嘌呤的MS培養基中25℃培養30天，長出幼芽；

三、將步驟二長出的幼芽移植于每升含有1.0mg萘乙酸和10mg多效唑的1/2MS培養基中培養20天，得到沙棗試管苗，然后經過煉苗，即完成沙棗的組織培養；

其中步驟一MS培養基中蔗糖濃度為30g/L、瓊脂濃度為5.5g/L，MS培養基的pH值為5.8。

2.根據權利要求1所述的一種沙棗組織培養方法，其特征在于步驟一反復沖洗后將枝條剪成30±0.5cm長，枝條放入透明玻璃瓶中基部浸入清水中2～4cm進行水培，每天更換1次清水，并且每天用無菌純凈水噴灑枝條表面3～20次。

3.根據權利要求2所述的一種沙棗組織培養方法，其特征在于步驟一水培在朝陽的室內進行，室溫保持在24±0.5℃。