[發明專利]一種中華戈登氏菌及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310541487.X
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN103555630A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 張素琴;康建南;張世敏
• 申請（專利權）人: 張素琴
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/16;A61K35/74;A61P37/02;A61P39/06;A61P1/14;A61P9/00;C12R1/01
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術領域

本發明涉及生物醫學工程領域，具體涉及一株中華戈登氏菌sq-15，還涉及一種中華戈登氏菌sq-15的制備方法，還涉及中華戈登氏菌sq-15的應用。

背景技術

眾所周知，人體的神經系統，內分泌系統和免疫系統緊密地聯系在一起，共同構成一個全身性調節網絡即：神經—內分泌—免疫網絡（NEI網絡），這個網絡支配著機體的各個功能，一旦網絡的功能異常立即會引起不同程度或形式的全身性反應，也就會出現各類疾病的發生，而在許多感染性疾病的治療過程中，細胞的免疫功能起重要作用，而一些亞健康和已發病的個體也是由于免疫力低下使得純粹的化學藥物預防和治療的效果不佳。因此以生物調解劑（免疫調節劑）治療生理性病變引起的多種疑難病癥取得了很好的效果，成為21世紀免疫療法和生態療法的極為關注的熱點。

許多研究發現：分枝桿菌，戈登氏菌的細胞壁有著特殊的結構，那就是胞壁酰二肽和分枝桿菌多糖（分別為MDP和MSP）。它們都具有明顯的免疫調節功能，尤其調節細胞的免疫應答。更引人注目的是：MDP如果在脂質體中激活巨噬細胞的活性可增加10～100倍，它與膠原蛋白或白蛋白共價交聯后的生理活動比單純的MDP強2000倍。而MSP則是以乙酰氨基葡萄糖的磷酸鏈和阿拉伯糖、半乳糖以及長鏈（約50至90個C原子）不飽和脂肪酸，構成了脂多糖，免疫活性更強。另一方面，近年來該類菌的非甲基化磷酸胞苷酰基鳥苷的寡聚脫氧核苷酸序列（CPG）又稱免疫液活序列，它能阻止Th₂型免疫應答的啟動并且使其向Th₂型免疫應答轉Th₁型，而應激則是Th₂型免疫應答提高。顯而易見這對于由于應激而引起的感染、過敏和腫瘤的發生卻起著重要治療作用。

發明者自上世紀80年代中期開始致力于分支桿菌等低等放線菌的研究，相續進行EM菌的應用基礎研究。并有三個中國專利：“生態平衡營養精活素及其生產方法”；“草分枝桿菌免疫液”；“一種草分枝桿菌sq-1及復合微生態制劑的制備方法”得到保護。同時在人和動物的保健與治療中得以推廣和應用。實現了多年來發明者用微生物技術提高人類生存質量的夢想。相繼在上世紀末和本世紀初在環境的生態治理和生物修復的應用研究中，發現多種戈登氏菌，同樣含有胞壁酰二肽、多糖等多種生理活性成分，更重要的是它們的脂多糖的不飽和脂肪酸的碳原子只有50個左右使其生理活性更強，賦予了該類菌的抗氧化、免疫調節等多種功能。尤其是本發明中的中華戈登氏菌sq-15，不同于世界上已有戈登氏菌中的任何一種。

發明內容

本發明的目的在于提供一種中華戈登氏菌sq-15（Gordonia?sinensis?sq-15），該菌由發明者從空氣中自行分離得到，該菌已于2013年3月5日送至中國典型培養物保藏中心進行保藏。地址：中國武漢武漢大學；分類命名：中華戈登氏菌sq-15Gordonia?sinensis?sq-15，保藏編號：CCTCC?NO：M2013065。該細菌在察氏培養基中產生胞壁酰二肽和脂多糖、胡蘿卜素和類胡蘿卜素、黃酮和多種氨基酸，尤其是γ-氨基丁酸、維生素以及多種微量元素。它們有機和諧地在一個系統之中，充分加強了系統的生理功能，有效地提高機體免疫力，達到抗氧化的目的。

本發明還有一個目的在于提供一種中華戈登氏菌sq-15的制備方法，制備方法簡單，易行，適于大規模生產。

本發明還有一個目的在于提供了一種中華戈登氏菌sq-15的應用。該細菌可直接用于制備免疫調節劑，或動物飼料添加劑，或將其與益生菌配合使用協同調節機體功能，如：可與枯草芽孢桿菌；富硒釀酒酵母按不同的重量比進行混合，可制得不同的藥物組合物，對腸道系統，心血管系統的病變均有明顯預防與治療的作用。

為了實現上述目的，本發明采取以下技術措施：

一種中華戈登氏菌sq-15，其篩選過程是：

用察氏培養基制成平板用自然沉降法在空氣中暴露15分鐘（湖北，武漢），蓋好平皿放置于25～32℃恒溫培養箱中培養2天左右，再選出單個菌落，經多次優化培養得到一株中華戈登氏菌sq-15。

該菌在1sp-2培養基中培養，溫度30℃±1℃，液體培養在150～180rpm振培2-3天。將優良菌株的斜面保持在4℃的條件下。（所述的1sp-2培養基在中國農業菌種目錄2012版附錄1，培養基編號為0038）。長期保存可以在甘油中﹣40℃～﹣70℃保存，或用牛奶凍干4℃左右保存。