[發(fā)明專利]一種小鼠組織mRNA的提取方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310540660.4
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN103614368A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 辛竹
• 申請（專利權(quán)）人: 辛竹
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生化實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，具體涉及一種小鼠組織mRNA的提取方法。

背景技術(shù)

mRNA，即信使核糖核酸，攜帶遺傳信息，在蛋白質(zhì)合成時(shí)充當(dāng)模板的RNA。從脫氧核糖核酸（DNA）轉(zhuǎn)錄合成的帶有遺傳信息的一類單鏈核糖核酸（RNA）。它在核糖體上作為蛋白質(zhì)合成的模板，決定肽鏈的氨基酸排列順序。mRNA存在于原核生物和真核生物的細(xì)胞質(zhì)及真核細(xì)胞的某些細(xì)胞器（如線粒體和葉綠體）中。mRNA的復(fù)制，轉(zhuǎn)錄和翻譯：由一個(gè)DNA分子，邊解旋，邊轉(zhuǎn)錄。利用細(xì)胞核內(nèi)部的游離核糖核苷酸和成其需要的堿基，規(guī)則遵循堿基互補(bǔ)配對原則。注：因?yàn)閙RNA沒有T（胸腺嘧啶），所以模版中出現(xiàn)A（腺嘌呤）時(shí)，由U(尿嘧啶）代替。以上過程叫做轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞核中完成。接著，mRNA穿過核孔。和細(xì)胞質(zhì)中的核糖體結(jié)合。選擇tRNA運(yùn)輸氨基酸，和對應(yīng)的三個(gè)堿基排列好（如何排列請查詢：密碼子）。再與其它的氨基酸通過肽鍵連接在一起，形成肽鏈。以上過程叫做翻譯，在細(xì)胞質(zhì)中完成。雖然人們已經(jīng)破譯了決定生命基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)的氨基酸合成密碼，也知道了是DNA攜帶著這種密碼，但是，根據(jù)細(xì)胞學(xué)所掌握的事實(shí)：所有DNA都呆在細(xì)胞核內(nèi)，而蛋白質(zhì)卻存在于細(xì)胞質(zhì)中，像DNA這樣的大分子是無法隨意進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)的。然而密碼總是會被帶入細(xì)胞質(zhì)的，這一來，人們不禁要問，是誰把鎖在細(xì)胞核內(nèi)的DNA手里的密碼帶入了細(xì)胞質(zhì)的呢？科學(xué)家們從DNA那里拷貝了一份密碼文件，并帶入了細(xì)胞質(zhì)中。經(jīng)過試驗(yàn)和觀察，發(fā)現(xiàn)這個(gè)信使就是RNA——核糖核酸。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于，針對現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種技術(shù)方案：

一種小鼠組織mRNA的提取方法，步驟如下：首先將小鼠進(jìn)行初步處理：即引頸處死法處死小鼠，然后解剖出其內(nèi)臟器官；加入組織研磨成粉末狀，搖勻后室溫靜置10分鐘；加入重量體積為百分之十的氯化鈣溶液，然后蓋緊蓋子；隨后搖晃，37攝氏度孵育5分鐘；加入體積比為百分之五十的異丙醇，然后高速離心；棄上清；保留ＲＮＡ沉淀；加入無水乙醇；靜置半小時(shí)后再次高速離心，時(shí)間為２分鐘；用瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測即可。

本發(fā)明中，所述瓊脂糖凝膠質(zhì)量百分比為百分之十。

本發(fā)明中，棄上清之前需要進(jìn)行干燥，在溫度為８０度的烤箱中烘烤一分鐘。

本發(fā)明的有益效果是：操作簡單，成本較低，可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選，重復(fù)操作性強(qiáng)，篩選精確。

具體實(shí)施方式

一種小鼠組織mRNA的提取方法，其特征在于，步驟如下：首先將小鼠進(jìn)行初步處理：即引頸處死法處死小鼠，然后解剖出其內(nèi)臟器官；加入組織研磨成粉末狀，搖勻后室溫靜置10分鐘；加入重量體積為百分之十的氯化鈣溶液，然后蓋緊蓋子；隨后搖晃，37攝氏度孵育5分鐘；加入體積比為百分之五十的異丙醇，然后高速離心；棄上清；保留ＲＮＡ沉淀；加入無水乙醇；靜置半小時(shí)后再次高速離心，時(shí)間為２分鐘；用瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測即可；所述瓊脂糖凝膠質(zhì)量百分比為百分之十；棄上清之前需要進(jìn)行干燥，在溫度為８０度的烤箱中烘烤一分鐘。

以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。