[發明專利]一種抗凝血補骨脂有效成分及其提取分離方法、應用

無效

• 申請號: 201310540147.5
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN103626785A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 康文藝;張偉;尹震花;彭濤
• 申請（專利權）人: 黃河科技學院
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;A61K31/37;A61P7/02
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 郭麗娜

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技術領域????

本發明屬于中藥提取技術領域，具體涉及一種抗凝血補骨脂有效成分及其提取分離方法、應用。

背景技術????

補骨脂Psoraleae?Fructus為豆科植物補骨脂Psoralea?corylifolia?Linn.的干燥果實，又名破故紙、黑故子等，為常用中藥，味辛、苦、性溫，歸腎、脾經，具有補腎助陽，納氣平喘，溫脾止瀉的功效。現代研究表明，補骨脂含黃酮類、香豆素類、脂肪酸類和單萜酚類等多種化學成分，具有抗氧化、降血糖、擴張血管、保肝、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、雌激素樣和抑制α-葡萄糖苷酶等作用。

異補骨脂素?(isopsoralene)，分子式：C₁₁H₆O₃；分子量：186.16；CAS登錄號：523-50-2；其對人胃癌細胞、人肝癌細胞、人白血病細胞、人前列腺癌細胞、人食管癌細胞、人肺癌細胞等在體外均具有一定程度的抑瘤活性；能夠抑制乙酰膽堿酯酶活性，并減輕大鼠的抑制回避反應和東莨菪堿引起的水迷宮癥狀所造成的損傷，而且能逆轉東莨菪堿造成的記憶缺失，一部分原因是與其抑制乙酰膽堿酯酶的活性并激活中央膽堿能系統有關。此外，異補骨脂素對MCF-7細胞增殖具有明顯的促進作用。?

補骨脂定?(psoralidin)，分子式：C₂₀H₁₆O₅；分子量：336.4；CAS登錄號：18642-23-4；其對蘋果腐爛病菌具有抑制活性，其EC₅₀為36.815?mg/L，EC₉₀為221.860?mg/L；可明顯縮短小鼠強迫游泳實驗中的游泳不穩時間，延長游泳時間，并且未表現出明顯毒性，且具有較強的抗豬油氧化活性，尤其是在0.02%和0.04%濃度時的抗氧化活性強于同濃度的BHT。

正常人由于有完整的血液凝固系統和抗凝及纖溶系統，所以血液在血管內既不凝固也不出血，始終自由流動完成其功能，但當機體處于高凝狀態或抗凝及纖溶減弱時，則發生血栓栓塞性疾病。使用抗凝血要可以防治血管內栓塞或血栓形成的疾病，預防中風或其它血栓性疾病。目前常用的抗凝血藥有肝素、香豆素類(雙香豆素、華法林和新抗凝等)和抗血小板藥(阿司匹林和潘生丁等)，此外蛇毒溶栓劑如去纖酶、抗栓酶和清栓酶可溶解已形成的血栓使血管再通。其中肝素對凝血過程的對個環節均有抑制作用，主要依賴于抗凝血酶Ⅲ；香豆素類是維生素K拮抗劑，在肝臟抑制維生素K由環氧化物向氫醌型轉化，從而阻止維生素K的反復利用，影響含有谷氨酸殘基的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的羧化作用，使這些因子停留于無凝血活性的前體階段，從而影響凝血過程；抗血小板藥通過抑制血小板環氧化酶的作用，并可防止血小板環氧化酶將花生四烯酸轉化成前列腺素中間體，從而起到防止血栓的形成。

目前尚無來自于補骨脂中異補骨脂素和補骨脂定對血漿復鈣時間影響的報道。

發明內容????

本發明的目的在于提供一種抗凝血補骨脂有效成分，同時提供一種抗凝血補骨脂有效成分的提取分離方法和應用。

為了實現以上目的，本發明采用以下技術方案：

一種抗凝血補骨脂有效成分的提取分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）補骨脂粉碎，用甲醇浸提，浸提液合并、過濾、濃縮得補骨脂甲醇浸膏，補骨脂甲醇浸膏分散于（75-85%v/v）甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，所得石油醚萃取物即為石油醚部位；

2）石油醚部位進行200~300目硅膠柱色譜，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，體積比例為100:1~7:3，以TCL檢測合并，各組分再反復經硅膠H、Sephadex?LH-20柱色譜和重結晶等得到化合物1和?2。

按照以上提取分離方法得到的抗凝血補骨脂有效成分。

抗凝血補骨脂有效成分在抗凝血方面的應用。

抗凝血補骨脂有效成分在制備抗凝血藥物方面的應用。

所述補骨脂甲醇浸膏的具體制備方法為：補骨脂粉碎后，用甲醇（90%?v/v以上）室溫浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、過濾、濃縮得補骨脂甲醇浸膏。

化合物1、2分別是異補骨脂素和補骨脂定，其結構如下：

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