[發明專利]對混合噬菌體克隆滴度進行測定的方法

在審

• 申請號: 201310539941.8
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN103614491A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 辛竹
• 申請（專利權）人: 辛竹
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生化實驗領域，具體涉及對混合噬菌體克隆滴度進行測定的方法。

背景技術

當近緣的A，B二種噬菌體感染同一寄主細胞時，子代噬菌體中常出現B噬菌體外殼中包著A噬菌體的染色體（即核酸），或A噬菌體外殼中包著B噬菌體的染色體（即核酸）的情況。這種形成核酸（基因型）與由外殼決定寄主范圍等性質（表現型）不同的噬菌體粒子的現象稱為混合噬菌體。含有重組DNA分子的克隆子被稱為重組子，如果重組子中含有外源目的基因則又稱為陽性克隆子或期望重組子?。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于，針對現有技術缺陷，提供一種技術方案：

對混合噬菌體克隆滴度進行測定的方法，首先取需要接種挑取的宿主菌，并將其加入事先準備好的培養液中；35攝氏度的環境下對其進行輕微振蕩，直至對數生長期；振蕩結束后，用生理鹽水進行稀釋，大約將其稀釋20-30倍；稀釋后將其注入離心管中，再加入菌液，室溫下靜置懸空；最后加入培養基；凝固后30攝氏度倒置培養過夜；高速離心12000rpm，棄上清，懸浮顆粒即為所需。

本發明中，得到的懸浮顆粒需要在零下1攝氏度的環境下進行冷藏。

本發明中，所述培養基需要先預熱，然后靜置5小時候使用。

本發明的有益效果是：操作簡單，成本較低，可以準確進行篩選，重復操作性強，篩選精確。

具體實施方式

對混合噬菌體克隆滴度進行測定的方法，首先取需要接種挑取的宿主菌，并將其加入事先準備好的培養液中；35攝氏度的環境下對其進行輕微振蕩，直至對數生長期；振蕩結束后，用生理鹽水進行稀釋，大約將其稀釋20-30倍；稀釋后將其注入離心管中，再加入菌液，室溫下靜置懸空；最后加入培養基；凝固后30攝氏度倒置培養過夜；高速離心12000rpm，棄上清，懸浮顆粒即為所需，得到的懸浮顆粒需要在零下1攝氏度的環境下進行冷藏，所述培養基需要先預熱，然后靜置5小時候使用。

以上所述，僅為本發明較佳的具體實施方式，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。