[發明專利]對PCR產物進行純化的方法

在審

• 申請號: 201310539571.8
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN103614367A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 辛竹
• 申請（專利權）人: 辛竹
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生化實驗領域，具體涉及對PCR產物進行純化的方法。

背景技術

聚合酶鏈式反應(Polymerase?Chain?Reaction)，簡稱PCR，是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA片段。可看作生物體外的特殊DNA復制。DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，加入設計引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。但是，DNA聚合酶在高溫時會失活，因此，每次循環都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價格昂貴，制約了PCR技術的應用和發展。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于，針對現有技術缺陷，提供一種技術方案：

對PCR產物進行純化的方法，步驟如下：首先，在進行pcr的時候，預先準備好將其產物進行收集；然后轉移到離心管中，10000prm高速離心1分鐘，取其沉淀物，棄濾液；然后將沉淀物中加入氯仿，高速離心一分鐘；再加入同等體積的無水乙醇；搖晃，振蕩，五分鐘；室溫下靜置；用洗滌液進行洗滌，使ＤＮＡ洗脫；瓊脂糖凝膠電泳檢測，即可回收ＰＣＲ產物。

本發明中，所述瓊脂糖凝膠質量百分比為百分之二十。

本發明中，在進行電泳檢測之前，需要溫浴三分鐘，溫度為不超過３０攝氏度本發明的有益效果是：操作簡單，成本較低，可以準確進行篩選，重復操作性強，篩選精確。

具體實施方式

對PCR產物進行純化的方法，步驟如下：首先，在進行pcr的時候，預先準備好將其產物進行收集；然后轉移到離心管中，10000prm高速離心1分鐘，取其沉淀物，棄濾液；然后將沉淀物中加入氯仿，高速離心一分鐘；再加入同等體積的無水乙醇；搖晃，振蕩，五分鐘；室溫下靜置；用洗滌液進行洗滌，使ＤＮＡ洗脫；瓊脂糖凝膠電泳檢測，即可回收ＰＣＲ產物；所述瓊脂糖凝膠質量百分比為百分之二十；在進行電泳檢測之前，需要溫浴三分鐘，溫度為不超過３０攝氏度。

以上所述，僅為本發明較佳的具體實施方式，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。