[發(fā)明專利]一種棉花脅迫應(yīng)答相關(guān)蛋白GhGeBP及其編碼基因與應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310538033.7
• 申請日: 2013-11-04
• 公開（公告）號(hào): CN104610438A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 華金平;蘇瑩;張曦;甄軍波;王玉美
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/415
• 分類號(hào): C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/11;A01H5/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)的植物遺傳改良技術(shù)及植物生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種棉花脅迫應(yīng)答相關(guān)基因及其編碼蛋白與應(yīng)用。

背景技術(shù)

GeBP（GL1enhancer?binding?protein）是植物中特有的一種轉(zhuǎn)錄因子家族，擬南芥中包含23個(gè)成員，陸地棉中發(fā)現(xiàn)該家族5個(gè)成員基因。Julien?Curaba?et?al.（2003）曾報(bào)道GeBP主要是營養(yǎng)器官的分生組織和幼嫩的葉原基表達(dá)，作為抑制子決定葉片細(xì)胞分化命運(yùn)；Chevalier?et?al.（2008）研究表明，GeBP和類GeBP蛋白編碼一類非保守的新型包含亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子蛋白，并且這類蛋白參與到Cytokinin?pathway中，抑制ARR基因?qū)?xì)胞分裂素應(yīng)答的負(fù)調(diào)控作用。Perazza?et?al.（2011）研究結(jié)果為CPR5（CONSTITUTIVE?EXPRESSOR?OF?PATHOGENESIS-RELATED?GENES5）和GeBP/GPLs在調(diào)控細(xì)胞膨大方面起相反作用。但是關(guān)于GeBP在植物抗逆方面的作用尚無研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種蛋白及其編碼基因和其應(yīng)用。本發(fā)明所提供的蛋白名稱為GhGeBP，來源于陸地棉（Gossypium?hirsutum）。

本發(fā)明所述蛋白是如下1）或2）的蛋白：

1）序列表中的SEQ?ID?№.2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

2）將序列表中的SEQ?ID?№.2的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物脅迫應(yīng)答相關(guān)的由1)衍生的蛋白質(zhì)。

序列表中SEQ?ID?№.2所示的氨基酸序列由389個(gè)氨基酸殘基組成。

上述1）和2）中的GhGeBP蛋白可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。上述1）和2）中的GhGeBP蛋白的編碼基因可通過將序列表中SEQ?ID?№.1的第88-1254位核苷酸所示的DNA序列缺失一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的密碼子，和/或進(jìn)行一個(gè)或幾個(gè)堿基對的錯(cuò)義突變后得到。

編碼所述GhGeBP蛋白的核酸分子也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因組DNA或重組DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA、hnRNA或tRNA等。

本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供所述蛋白的編碼基因。

所述編碼基因具有下述核苷酸序列之一：

1）序列表中SEQ?ID?№：1第88-1254位的核苷酸序列；

2）編碼序列表中SEQ?ID?№：2蛋白質(zhì)序列的多核苷酸序列；

3）在高嚴(yán)謹(jǐn)條件下可與序列表中SEQ?ID?№：1限定的DNA序列雜交的核苷酸序列；

4）與1）或2）或3）限定的DNA序列具有90％以上同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列；具體的，所述同源性為95%以上；再具體的為96%以上；再具體的為97%以上；再具體的為98%以上；再具體的為99%以上。

上述高嚴(yán)謹(jǐn)條件可為用6×SSC，0.5%SDS的溶液，在65℃下雜交，然后用2×SSC，0.1%SDS和1×SSC，0.1%SDS各洗膜一次。

其中，序列表中的SEQ?ID?№：1由1378個(gè)核苷酸組成，其開放閱讀框架（ORF）為自5′末端第88-1254位核苷酸，編碼序列表中SEQ?ID?№：2所示的蛋白質(zhì)，即本發(fā)明所述的GhGeBP蛋白。

含有上述核酸分子的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

所述重組載體可為重組表達(dá)載體，也可為重組克隆載體。