[發明專利]一種雙色熒光檢測細胞活性的方法無效
| 申請號： | 201310536074.2 | 申請日： | 2013-10-31 |
| 公開（公告）號： | CN103529010A | 公開（公告）日： | 2014-01-22 |
| 發明（設計）人： | 李瑞彪;伍誼波;第五振軍;廖勁芳 | 申請（專利權）人： | 天津百螢生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N21/64 | 分類號： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人： | 陸藝 |
| 地址： | 300457 天津市濱海新區*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 熒光 檢測 細胞 活性 方法 | ||
1.一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是包括如下步驟：
a)分別將1-10mM二氯鈣黃綠素脂(I)溶液和1-10mM吡啶化乙啶(II)溶液加杜氏磷酸緩沖液得到1-10μM二氯鈣黃綠素脂(I)工作溶液和1-10μM吡啶化乙啶(II)工作溶液，所述二氯鈣黃綠素脂(I)溶液和吡啶化乙啶(II)溶液的溶劑為二甲基亞砜或乙醇；
b)向細胞樣品中加入10-50μL的二氯鈣黃綠素脂(I)工作溶液和10-50μL吡啶化乙啶(II)工作溶液，在37℃，5％CO2培養30-60分鐘；
c)觀測步驟b)所獲得的細胞的紅色和／或綠色熒光；
所述二氯鈣黃綠素脂(I)的結構式為：
所述吡啶化乙啶(II)結構式為：
2.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是步驟a)所述細胞樣品中細胞的濃度為30000-50000個細胞／100uL。
3.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是步驟a)所述細胞為哺乳動物細胞。
4.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是所述二氯鈣黃綠素脂(I)溶液的濃度為5-10mM。
5.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是所述吡啶化乙啶(II)溶液的濃度為5-10mM。
6.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是所述杜氏磷酸緩沖液的pH=7.2。
7.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是步驟b)所述觀測的儀器為熒光顯做鏡。
8.根據權利要求1所述的一種雙色熒光檢測細胞活性的方法，其特征是步驟b)所述觀測的儀器為熒光酶標儀。
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