[發(fā)明專利]提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310535035.0
• 申請(qǐng)日: 2013-11-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103555693A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賀靜;馬詩(shī)淳;代莉蓉;陳璐;鄧宇;周正
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 農(nóng)業(yè)部沼氣科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C12N9/42
• 分類號(hào): C12N9/42;C12R1/01
• 代理公司: 成都天嘉專利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 毛光軍

1.一種提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

a、將菌種（clostridium?thermocellum）DSM1237^T配制成一級(jí)菌種液；

b、將一級(jí)菌種液加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，一級(jí)菌種液與基礎(chǔ)培養(yǎng)基的體積比為1：10至1：20，發(fā)酵培養(yǎng)48-72小時(shí)為二級(jí)菌種液；

c、將培養(yǎng)后的二級(jí)菌種液加入到配制的發(fā)酵培養(yǎng)基中，二級(jí)菌種液與發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1：30~1：10；

d、發(fā)酵培養(yǎng)：溫度50~70℃，厭氧，壓力-0.1MPa~0.1MPa，靜置，pH值6.5~8.0，培養(yǎng)時(shí)間為48~72h。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟b中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為：硫酸銨1.30?g/L，氯化鎂2.60?g/L，磷酸二氫鉀1.43?g/L，磷酸氫二鉀5.50?g/L，氯化鈣?0.13?g/L，硫酸鐵1.10?mg/L，半胱氨酸0.25?g/L，酵母膏?4.50?g/L，刃天青?1.0?mg/L，?微晶纖維素10.00?g/L或纖維二糖5.00?g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟c中配制的發(fā)酵培養(yǎng)基為：硫酸銨1-2?g/L??氯化鎂2-3?g/L，磷酸二氫鉀?1-2?g/L，磷酸氫二鉀?5-6g/L，氯化鈣0.1-0.3?g/L，硫酸鐵?1-2?mg/L，半胱氨酸0.2-0.5?g/L，氮源?4-6?g/L，刃天青?1.0?mg/L，碳源10.0-12.0?g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基在配制時(shí)，滅菌前調(diào)節(jié)pH到7.0，121℃滅菌?30分鐘。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述碳源為微晶纖維素(Avicel)、木聚糖（xylan）、殼聚糖、稻草粉之中二種或三種碳源按2：8或2：6：2的質(zhì)量比例組合。

6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述氮源為有機(jī)氮源，包括酵母粉、尿素、生物素中的一種或多種按任意比例的組合。

7.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的提高熱纖梭菌纖維素酶活的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述發(fā)酵的方式包括分批發(fā)酵、補(bǔ)料-分批發(fā)酵或半連續(xù)發(fā)酵。