[發(fā)明專利]人或動(dòng)物排泌物內(nèi)有形成分高通量定量分析方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310532007.3
• 申請(qǐng)日: 2013-11-03
• 公開（公告）號(hào): CN103645130A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 凌鐵如;張之曦;李志雄;湛璇;謝文鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南歐杰生物科技發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): G01N15/14
• 分類號(hào): G01N15/14;G01N1/38
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)療檢驗(yàn)領(lǐng)域,尤其涉及一種人或動(dòng)物排泌物內(nèi)有形成分高通量定量分析方法。

背景技術(shù)

目前，對(duì)于人或動(dòng)物排泌物的采集和檢驗(yàn)分析過(guò)程如下：取一部分排泌物放到容器中，如紙盒或塑料杯中，收集人員將容器送入檢驗(yàn)室，檢驗(yàn)人員將2滴稀釋液滴在玻片上，再用棉簽或小竹片從容器中取綠豆大小的樣本涂在玻片上，攪拌均勻，再放在顯微鏡下觀察。同時(shí)觀察樣本的顏色、硬度、粘液等理學(xué)性狀，用低倍鏡觀察蟲卵的數(shù)量，如原蟲、勾蟲、蛔蟲的蟲卵數(shù)量，再用高倍鏡觀察樣本里的有形成分，如紅細(xì)胞、白細(xì)胞、霉菌絲或特殊結(jié)晶的數(shù)量。如需檢查隱血情況，則用取以上稀釋后的樣本滴在試紙上，觀察試紙的變化情況。然后根據(jù)上述觀察的結(jié)果出具檢驗(yàn)報(bào)告，檢驗(yàn)報(bào)告的內(nèi)容包括樣本的性狀，如顏色、硬度、粘液，還包括樣本的鏡檢結(jié)果，如含有多少個(gè)蟲卵，多少個(gè)紅細(xì)胞等，以及隱血的試驗(yàn)結(jié)果。以上對(duì)人或動(dòng)物排泌物的采集和檢驗(yàn)分析過(guò)程存在生物安全隱患、操作不衛(wèi)生、氣味大等缺點(diǎn)，檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定，難以重復(fù)再現(xiàn)同樣的檢驗(yàn)結(jié)果，對(duì)同一樣本進(jìn)行多次采集檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)，偏差很大，操作過(guò)程不能標(biāo)準(zhǔn)化。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有方法學(xué)的不足，提供一種符合生物安全標(biāo)準(zhǔn)、操作過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的人或動(dòng)物排泌物內(nèi)有形成分高通量定量分析方法。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的：人或動(dòng)物排泌物內(nèi)有形成分高通量定量分析方法，其特征在于：它包括以下步驟：

（1）用取樣器取限量的人或動(dòng)物排泌物，作為待檢樣品；

（2）取一個(gè)已知體積或重量的容器，將定量的稀釋液和待檢樣品加入到該容器中；

（3）將稀釋液與待檢樣品攪拌均勻，形成混懸液；

（4）用測(cè)量?jī)x器對(duì)已加入稀釋液與待檢樣品的容器的體積或重量進(jìn)行精確測(cè)量；

（5）取一塊檢測(cè)板，檢測(cè)板中部設(shè)有一個(gè)已知深度的計(jì)數(shù)池，將混懸液注滿計(jì)數(shù)池；

（6）將注滿混懸液的計(jì)數(shù)池放在已知視野面積的顯微鏡下進(jìn)行圖像采集分析。

進(jìn)一步的，所述步驟（1）中的取樣器是一個(gè)下端設(shè)有葉片的取樣棒，所述葉片有多個(gè)，在中心部位聯(lián)結(jié)在一起，呈風(fēng)車葉片狀，互相之間間隔形成固定大小的空間區(qū)域，將取樣棒插入人或動(dòng)物排泌物中，旋轉(zhuǎn)取樣棒，排泌物即被采入葉片之間的區(qū)域。

進(jìn)一步的，所述步驟（3）中的攪拌是采用磁力攪拌的方式進(jìn)行的，先將磁性物體加入已裝好稀釋液和待檢樣品的容器中，再在容器外加一個(gè)不斷變化的磁場(chǎng)，使磁性物體在變化磁力作用下不斷轉(zhuǎn)動(dòng)，使稀釋液和待檢樣品充分混合均勻，形成混懸液。

優(yōu)選的，所述步驟（4）中所述的測(cè)量?jī)x器為CCD掃描傳感器，用CCD掃描傳感器對(duì)容器內(nèi)的混懸液體積進(jìn)行精確測(cè)量。

優(yōu)選的，所述步驟（4）中所述的測(cè)量?jī)x器為分析天平，用分析天平對(duì)包含混懸液的容器進(jìn)行精確稱量。

進(jìn)一步的，所述步驟（5）中的檢測(cè)板為連續(xù)流動(dòng)檢測(cè)板，所述連續(xù)流動(dòng)檢測(cè)板包括入口管、計(jì)數(shù)池和出口管，所述入口管和出口管設(shè)在計(jì)數(shù)池兩端，并與計(jì)數(shù)池連通，所述計(jì)數(shù)池的深度為已知數(shù)值，混懸液通過(guò)入口管進(jìn)入計(jì)數(shù)池，在顯微鏡下進(jìn)行圖像采集。

優(yōu)選的，上述步驟（1）～（6）是在常溫常壓的密閉系統(tǒng)中進(jìn)行的。

本發(fā)明的積極效果在于：?

（1）與現(xiàn)有分析方法相比，本發(fā)明最大的優(yōu)點(diǎn)在于可以定量分析，能確切測(cè)量出人或動(dòng)物排泌物單位體積內(nèi)或單位重量的有形成分?jǐn)?shù)量，其結(jié)果精確度高、誤差小、代表性強(qiáng)，可以避免傳統(tǒng)取樣分析方法的不確定性，分析結(jié)果的片面性，防止誤診。

（2）本發(fā)明方法過(guò)程嚴(yán)謹(jǐn)，具有定量性，可以實(shí)現(xiàn)取樣分析過(guò)程的科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化。

（3）本發(fā)明采用取樣棒取樣，取樣棒的下部為風(fēng)車葉片式的取樣頭，操作人員只需旋轉(zhuǎn)取樣棒，樣本即被采入中片之間的區(qū)域，取樣的數(shù)量較為穩(wěn)定，操作過(guò)程簡(jiǎn)單、衛(wèi)生、科學(xué)。

（4）本發(fā)明采用磁力攪拌，在容器外加一個(gè)不斷變化的磁場(chǎng)，使磁性物體在變化磁力作用下不斷轉(zhuǎn)動(dòng)，使稀釋液和待檢樣品充分混合均勻，形成混懸液。這種攪拌方式與傳統(tǒng)的用小棒或小棍攪拌相比，具有攪拌速度快、攪拌效果好等顯著優(yōu)點(diǎn)。

（5）本發(fā)明取樣、稀釋、磁力攪拌、計(jì)數(shù)池觀察，速度快，！與傳統(tǒng)方法相比，具有明顯的高通量?jī)?yōu)點(diǎn)。

（6）整個(gè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程是在密閉系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行的，無(wú)氣味、無(wú)污染，利于實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)，符合生物安全要求。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中的取樣棒的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2為本發(fā)明實(shí)施例1中的連續(xù)流動(dòng)檢測(cè)板的結(jié)構(gòu)示意圖。