[發明專利]將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離

有效

• 申請號: 201310530972.7
• 申請日: 2013-10-31
• 公開（公告）號: CN103555662A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 于建香;帥志強;蘇冠宇;武光明;姚天宇
• 申請（專利權）人: 大連金弘基種畜有限公司;北京石油化工學院
• 主分類號: C12N5/076
• 分類號: C12N5/076;G01N15/14
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 吳開磊

1.將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，包括下列步驟：

向待分離的精液中加入熒光染料和染色用工作液，再孵育，得到混合液，其中，所述熒光染料為四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯，并且所述待分離的精液中每含4億個精子時，至少加入7μg所述熒光染料；

采用流式細胞儀對所述混合液進行分離，得到分離的X精子和Y精子。

2.根據權利要求1所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述孵育的時間為：

40-50min。

3.根據權利要求1所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述待分離的精液為：活力≥0.6，密度≥10億/mL的精液。

4.根據權利要求1所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述孵育的步驟之后和所述分離的步驟之前還包括：

向所述混合液中加入蛋黃工作液。

5.根據權利要求1所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述向待分離的精液中加入熒光染料和染色用工作液的步驟之前還包括：

向所述待分離的精液中加入抗生素。

6.根據權利要求1所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述向待分離的精液中加入熒光染料和染色用工作液的步驟之前還包括：

在30-35℃下將所述熒光染料和所述染色用工作液預熱。

7.根據權利要求4所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述向所述混合液中加入蛋黃工作液的步驟之前還包括：

在30-35℃下將所述蛋黃工作液預熱。

8.根據權利要求1所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述向待分離的精液中加入熒光染料和染色用工作液的步驟之前還包括：

用孔徑為45-55μm的過濾器過濾所述待分離的精液。

9.根據權利要求4所述的將四溴化1,1,2,2-四-[4-(2-三乙基乙氧基胺基)]苯乙烯應用于精子分離，其特征在于，所述向所述混合液中加入蛋黃工作液的步驟之后和所述分離的步驟之前還包括：

用孔徑為45-55μm的過濾器過濾混合液。