[發(fā)明專利]一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310526385.0
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN103554226A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇賢斌;葉青;毛怡春;董海軍
• 申請（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 沈振濤

1.一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）按照固相合成的方法，F(xiàn)moc氨基樹脂在Fmoc脫保護試劑作用下反應(yīng)脫去Fmoc后，在偶聯(lián)體系作用下于偶聯(lián)溶劑中從C端到N端依次依肽序依次連接Fmoc氨基酸，合成十四肽氨基樹脂，所述十四肽樹脂為PG-Gly-Arg-Cys(X₂)-Cys(X₁)-His-Pro-Ala-Cys(X₂)-Gly-Lys-Asn-Tyr-Ser-Cys(X₁)-氨基樹脂，或為PG-Gly-Arg-Cys(X₁)-Cys(X₂)-His-Pro-Ala-Cys(X₁)-Gly-Lys-Asn-Tyr-Ser-Cys(X₂)-氨基樹脂；其中，PG為Fmoc或Boc，X₁為Trt或Mmt，X₂為Acm；

（2）在氧化體系的作用下，十四肽氨基樹脂反應(yīng)脫除X₁和X₂；

（3）步驟（2）產(chǎn)物在脫除N端保護基后，在裂解體系作用下裂解脫除側(cè)鏈保護基，即得α-芋螺毒素MI。

2.權(quán)利要求1所述的一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步驟（1）中，所述Fmoc氨基樹脂為Rink?Amide樹脂、Rink?Amide?AM樹脂、Rink?Amide?MBHA樹脂、Rink?Amide?PEGA樹脂或PAL樹脂。

3.權(quán)利要求1所述的一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步驟（1）中，F(xiàn)moc脫保護試劑為哌啶，脫保護反應(yīng)溫度為10-30℃，反應(yīng)時間為5-60min。

4.權(quán)利要求1所述的一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步驟（1）中，偶聯(lián)溶劑選自DCM、DMF和NMP中的任意一個或一個以上的組合；偶聯(lián)體系選自HOBt、HOAt、HOOBt和Cl-HOBt中的任意一個或多個與DIC的組合，或選自HOBt、HOAt、HOOBt和Cl-HOBt中的任意一個或多個、DPIEA或NMM中的任意一個或兩個以及HBTU、HATU、PyBOP和PyAOP中的任意一個或多個的組合；偶聯(lián)溶劑與Fmoc脫保護試劑的體積比為（1-5）:1。

5.權(quán)利要求1所述的一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步驟（2）中，所述氧化體系為碘的混合溶劑溶液，其中混合溶劑為體積比為（1-8）:1的二氧六環(huán)和甲醇的混合溶液，或為體積比為（1-8）:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶液，或為體積比為（1-8）:1的2,2,2-三氟乙醇和二氯甲烷的混合溶液，或為體積比為（1-8）:49的N-甲基吡咯烷酮和苯甲醚的混合溶液，或為體積比為（1-8）:1的2,2,2-三氟乙醇和氯仿的混合溶液，或為體積比為（1-8）:1的六氟異丙醇和氯仿的混合溶液；其中，碘和十四肽氨基樹脂的摩爾比為（5-20）：1；反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為1-3h。

6.權(quán)利要求1所述的一種α-芋螺毒素MI的全固相合成方法，其特征在于：步驟（3）中，裂解體系為體積比為(80-96)：(1-5)：(1-5)：(1-5)：(1-5)的TFA、苯甲硫醚、三異丙基硅烷、苯甲醚和水；反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為1-4h。