[發(fā)明專利]防治棉花黃萎病的菌劑及其制備方法和它們的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310524820.6
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN103525742A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設計）人: 戴小楓;馬雪峰;陳捷胤;李蕾;孔志強;包郁明;肖紅利;徐明;桂月晶;祁偉彥;王新艷
• 申請（專利權）人: 中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/085;C12R1/39;C12R1/465
• 代理公司: 北京英創(chuàng)嘉友知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11447
• 代理人: 王浩然;桑傳標

技術領域

本發(fā)明涉及一種菌劑及其制備方法和應用；更確切地說，涉及一種防治棉花黃萎病的菌劑及其制備方法和它們在防治棉花黃萎病中的應用。

背景技術

棉花黃萎病是由大麗輪枝菌引起的一種真菌性病害，是一種危害性很大的維管束系統(tǒng)病害，由大麗輪枝菌引起的棉花黃萎病是幾乎所有棉花生產(chǎn)國棉花生產(chǎn)的主要限制因素。由于高抗黃萎病的棉花品種較少，且對黃萎病致病的機理以及棉花抗黃萎病的遺傳方式的了解還比較少，因此，目前對棉花黃萎病的防治還是以生物防治為主，但現(xiàn)有的生物菌劑對棉花黃萎病的防治效果均不夠理想，因此，迫切需要開發(fā)一種能夠有效防治棉花黃萎病的菌劑。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有生物菌劑存在的防治棉花黃萎病的效果不理想的問題，提供一種能夠有效防治棉花黃萎病的菌劑及其制備方法和它們的應用。

為了實現(xiàn)第一個發(fā)明目的，本發(fā)明提供了一種菌劑，該菌劑包括培養(yǎng)基和菌體，其中，所述菌體包括枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）、灰綠鏈霉菌（Streptomycesviridogriseus）和熒光假單胞桿菌（Pseudomonas?fluorescens）。

為了實現(xiàn)第二個發(fā)明目的，本發(fā)明還提供了一種菌劑的制備方法，其中，該方法包括：該方法包括：將枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）、灰綠鏈霉菌（Streptomycesviridogriseus）和熒光假單胞桿菌（Pseudomonas?fluorescens）接種于培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。

本發(fā)明還提供了所述的菌劑在預防棉花黃萎病中的應用。

本發(fā)明提供的的菌劑能夠有效防治棉花黃萎病，具有廣闊的應用前景。

具體實施方式

本發(fā)明提供了一種菌劑，該菌劑包括培養(yǎng)基和菌體，其中，所述菌體包括枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）、灰綠鏈霉菌（Streptomycesviridogriseus）和熒光假單胞桿菌（Pseudomonas?fluorescens）。

所述菌劑中含有的菌體的量可以在很大范圍內(nèi)改變，優(yōu)選情況下，每克所述菌劑所含的總活菌數(shù)可以為1-5×10¹⁰個。

優(yōu)選地，所述菌劑中，以所述菌劑中的總活菌數(shù)為基準，枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-50％、短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-50％、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-50%、灰綠鏈霉菌（Streptomycesviridogriseus）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-50%、熒光假單胞桿菌（Pseudomonas?fluorescens）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-50%

更優(yōu)選地，以所述菌劑中的總活菌數(shù)為基準，枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的25-35％、短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的25-35％、蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-15％、灰綠鏈霉菌（Streptomycesviridogriseus）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-15％、熒光假單胞桿菌（Pseudomonas?fluorescens）的活菌數(shù)可以為總活菌數(shù)的10-15％。

根據(jù)本發(fā)明，所述培養(yǎng)基的種類可以在很大范圍內(nèi)改變，可以為各種能夠用于培養(yǎng)枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、灰綠鏈霉菌、熒光假單胞桿菌的培養(yǎng)基，例如，可以為馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基和CM培養(yǎng)基中的一種或幾種，優(yōu)選為馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。上述培養(yǎng)基能夠商購得到或者根據(jù)“微生物培養(yǎng)基手冊”（Microbiology?Culture?Media?Manual）的記載制備得到。例如，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基（馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15～20g，水1000mL）的制備方法可以為：將200g去皮馬鈴薯切碎，煮爛后取得土豆汁，加入20g葡萄糖或者蔗糖，加入瓊脂15～20g，加水至1000mL，121℃滅菌即可。