[發明專利]同時檢測人腦鈉肽和N末端腦鈉肽前體的快速定量檢測裝置及檢測方法

有效

• 申請號: 201310524436.6
• 申請日: 2013-10-17
• 公開（公告）號: CN103529224A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 李洲;楊發青;周鴻銳
• 申請（專利權）人: 天津中新科炬生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明專利是涉及醫學臨床診斷技術領域，特別是涉及一種以免疫膠體金快速檢測方法制備的同時檢測人腦鈉肽和N末端腦鈉肽前體的快速定量檢測裝置及檢測方法。

背景技術

腦鈉肽(BNP)首先是由日本學者Sudoh等于1988年從豬腦中分離出來因而得名，也稱B型利鈉肽。人類腦鈉肽(BNP)廣泛分布于腦、心臟、肺臟、消化道、泌尿生殖道等組織中，其中以心臟的水平最高。心肌細胞不是直接合成BNP，而是先合成pro-BNP，pro-BNP具有108個氨基酸，在血液中會分解，分解下來的片段是其N端的76個氨基酸，即NT-ProBNP，剩下的32個氨基酸，即BNP。

研究發現，BNP對心衰的早期診斷、早期干預以及預后有很大幫助。在2001年修訂的歐洲心臟病學會心衰診療指南中，已經把腦鈉肽作為心衰診斷的工具。2005年歐洲和美國的指南，均進一步肯定了腦鈉肽在心衰診斷中的作用。由于BNP和NT-ProBNP來自于同一個前體，兩者之間具有密切的聯系。美國《臨床化學》雜志在2007年發表了一篇論文：《BNP和NT-proBNP在急慢性HF中的診斷精確性比較》，經過大量的文獻統計得出如下結論：BNP和NT-proBNP化驗在急性和慢性HF的診斷上具有較高的診斷精確性并具有較高的相關性。

從臨床診斷角度分析，BNP和NT-proBNP主要的區別如下：1)在體內的清除途徑不同：BNP的清除主要通過與鈉尿肽清除受體結合繼而被胞吞和溶酶體降解，只有少量的BNP通過腎臟清除，當腎功能缺失時，中性肽鏈內切酶(NEP)也可打開BNP的環狀結構而對它進行清除；NT-proBNP清除的唯一途徑是腎小球濾過，腎功能出現缺失對NT-proBNP的代謝影響極大。2)半衰期不同：BNP的半衰期是22分鐘，而NT-proBNP的半衰期為120分鐘。從臨床檢驗的角度考慮，NT-proBNP在體外相對較為穩定，給檢測帶來方便，但從臨床應用的角度考慮，BNP更短的半衰期更能及時反應患者病情變化，利于臨床監測治療效果，從而給臨床帶來更好的應用價值。3)BNP和NT-proBNP的cutoff值有很大區別，BNP公認的有臨床診斷價值的cutoff值是0.1ng/mL，NT-proBNP是0.3ng/mL。

目前BNP和NT-ProBNP檢測試劑在臨床都有應用，但尚未有同時檢測這兩種指標的快速檢測試劑/裝置出現。同時檢測可以實現兩個試劑的優勢互補，對檢測結果更加確信，可以排除因某些交叉反應造成的假陽性或分子異構造成的假陰性；可以分析出是否是腎功能代謝障礙造成的NT-ProBNP的假陽性，可以提高對心衰快速檢測的靈敏度。

發明內容

本發明目的是提供一種同時檢測人腦鈉肽和N末端腦鈉肽前體的快速定量檢測裝置及檢測方法，用來檢測血清、血漿和全血樣本中的BNP和NT-ProBNP。具有操作簡便、反應快速、結果準確、可信、適合現場檢測等優點。發明內容如下：

一種同時檢測人腦鈉肽和N末端腦鈉肽前體的快速定量檢測裝置及檢測方法，其特征在于裝置由相互獨立的人腦鈉肽(BNP)和N末端腦鈉肽前體(NT-ProBNP)檢測試紙、雙聯卡殼和內置了相應標準曲線和判定方法的免疫層析判讀結果記錄儀組成。

所述的檢測裝置，其特征在于BNP檢測試劑試紙由含有膠體金標記的抗人BNP抗體的膠體金墊、包被有配對BNP抗體(T線)和抗鼠IgG(C線)的NC膜、樣品墊、吸樣墊和塑料底板組成。NT-ProBNP檢測試劑試紙由含有膠體金標記的抗人NT-ProBNP抗體的膠體金墊、包被有配對NT-ProBNP抗體(T線)和抗鼠IgG(C線)的NC膜、樣品墊、吸樣墊和塑料底板組成。每個試紙的寬度為3-5mm，長度為7-8cm。樣品墊、膠體金墊、NC膜和吸樣墊從塑料底板一端依次排列至另一端。

所述的檢測裝置，其特征在于雙聯卡殼包含上蓋和下蓋兩個部分，內部可平行放置兩條檢測試紙。卡殼上蓋的下部對應樣品墊部分設置了樣品孔和稀釋液孔，用于加入樣本和稀釋液，卡殼上蓋的中間部分應對試紙NC膜中部設置了視窗口，用于觀察NC膜上的C、T線，判定結果。

所述的檢測裝置，其特征在于所述NC膜是一種由硝酸纖維素構成的多孔結構的膜，孔徑為8-15um。稀釋液墊為玻璃纖維膜或無紡布，吸樣墊為吸水濾紙。