[發明專利]一種石油降解菌群的固定化方法

有效

• 申請號: 201310523187.9
• 申請日: 2013-10-29
• 公開（公告）號: CN104140962B
• 公開（公告）日: 2017-11-03
• 發明（設計）人: 單海霞;何煥杰;劉明國;王中華;馬金;劉曉宇;位華
• 申請（專利權）人: 中國石油化工集團公司;中石化中原石油工程有限公司鉆井工程技術研究院
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12R1/38
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司41119
• 代理人: 韓天寶

1.一種石油降解菌群的固定化方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)石油降解菌群液體發酵；

(2)石油降解菌群在硅藻土/活性炭復合載體上的固定化；

其中，步驟(1)所述石油降解菌群包括假單胞菌Pseudomonus sp.、芽孢桿菌Bacillus sp.和微球菌Micrococcus sp.；假單胞菌Pseudomonus sp.、芽孢桿菌Bacillus sp.和微球菌Micrococcus sp.，按照質量比例1:1:1混合；

所述石油降解菌群液體發酵包括以下過程：向裝有高溫滅菌的發酵培養基的發酵罐中，按照5-10％的接種量接種石油降解菌群液體種子，于30-37℃，100-120r/min通空氣培養12-60h；按5-10％的接種量轉入另一裝有新鮮發酵培養基的發酵罐中進行轉接培養，當轉接次數大于5后，即得到石油降解菌群發酵液；

所述石油降解菌群固定化包括以下過程：將石油降解菌群發酵液同滅菌后的硅藻土/活性炭復合載體等體積混合，得到菌體一載體混合液，然后將混合液滴入CaC1₂溶液中，連續攪拌12-24h，室溫吹干、備用；

所述石硅藻土/活性炭復合載體，活性炭和硅藻土混合的質量比例為1:1。

2.根據權利要求1所述的石油降解菌群的固定化方法，其特征在于，所述石油降解菌群液體種子制備包括以下過程：取石油降解菌群，按照5-10％的總接種量接種于發酵培養基中，于30-37℃，100-120r/min，通空氣培養12-36h至培養基中石油降解菌群總數量為10⁸CFU/mL以上，得到石油降解菌群液體種子。

3.根據權利要求1所述的石油降解菌群的固定化方法，其特征在于，所述發酵培養基包含以下重量分數的組分：8-10％蛋白陳，3-5％牛肉浸膏，8-10％NaCl，所述培養基的pH為中性。