[發明專利]生物酶法生產蠶蛹油并提取α-亞麻酸的方法

有效

• 申請號: 201310522806.2
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN103540396A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 陳貴才;常藝海;侯保兵;王麗;聶月美;王賢玉;崔志文;丁瑜
• 申請（專利權）人: 浙江匯能動物藥品有限公司;甘肅匯能生物工程有限公司
• 主分類號: C11B1/02
• 分類號: C11B1/02;C11B1/00;C11B3/06;C11B3/00;C11C1/02;C11C1/08;C12P21/06
• 代理公司: 杭州賽科專利代理事務所 33230
• 代理人: 曹紹文

1.生物酶法生產蠶蛹油并提取α-亞麻酸的方法，其特征在于：所述方法包括下列步驟：

（1）烘干粉碎：蠶蛹經烘干粉碎過篩后，得到蠶蛹粉備用；

（2）水相酶解：按照料水質量比1:4~7將蠶蛹粉與水混合均勻，然后分兩步進行酶解：首先，按照蠶蛹粉質量1.0~2.0%的比例加入胃蛋白酶，于30~40℃酶解2~4h，酶解過程中控制pH值為1.0~2.0，然后按照蠶蛹粉質量1.0~2.0%的比例加入木瓜蛋白酶，于55~65℃酶解2~4h，酶解過程中控制pH為6.0~7.0，酶解完成后酶解液加熱至80~85℃滅酶；

（3）離心、油水分離：將酶解液離心分離得到殘渣和上清液，上清液加熱至50~60℃并靜置進行物理破乳，然后將上清液進一步通過離心分離得到蠶蛹毛油和蠶蛹多肽液；

（4）蠶蛹毛油精制：向蠶蛹毛油中加入2~4倍蠶蛹毛油體積的稀堿溶液，于30~40℃條件下攪拌1~3h，靜置一段時間，待油水分離后，去除稀堿液，得到蠶蛹精油；

（5）蠶蛹油脂肪酸制備：蠶蛹精油與1~1.2mol/L的氫氧化鈉溶液按體積比1:3~5混合，于60~70℃小攪拌反應2~4h，靜置冷卻至常溫，加水至澄清透明，調pH至2~3，加入蠶蛹精油3倍體積的石油醚或乙醚萃取，靜置后收集醚層，水洗至中性，醚層經脫水后于40~50℃回收石油醚或乙醚，獲得蠶蛹脂肪酸；

（6）尿素包埋：將尿素與甲醇以體積比1:2~3混合，在60~70℃的條件下攪拌至充分溶解，加入適量的蠶蛹脂肪酸，尿素:甲醇:蠶蛹脂肪酸的體積比為1:2~3:0.6~1.0，攪拌2~3h混勻，然后冷卻至室溫，在-15~-30℃條件下靜置包合20~35h，然后迅速減壓抽濾，濾液調pH至2.0~3.0，用3~5倍濾液體積的石油醚或乙醚萃取，取醚層水洗至中性，經脫水后于40~50℃回收石油醚或乙醚，得到純度70~75%的α-亞麻酸。

2.根據權利要求1所述的水相生物酶法生產蠶蛹肽粉和蠶蛹粕的方法，其特征在于：步驟（1）中所述蠶蛹于95~100℃條件下鼓風干燥至含水量≤12.0%，然后粉碎后過30~40目篩。

3.根據權利要求1所述的水相生物酶法生產蠶蛹肽粉和蠶蛹粕的方法，其特征在于：步驟（2）中酶解過程中的pH值通過稀鹽酸或氫氧化鈉水溶液進行調節。

4.根據權利要求1所述的水相生物酶法生產蠶蛹肽粉和蠶蛹粕的方法，其特征在于：步驟（2）中胃蛋白酶酶的酶活為：3000U/g，木瓜蛋白酶的酶活為：20萬U/g。

5.根據權利要求1所述的水相生物酶法生產蠶蛹肽粉和蠶蛹粕的方法，其特征在于：步驟（5）和步驟（6）中脫水選用的脫水劑為無水硫酸鈉。

6.根據權利要求1所述的水相生物酶法生產蠶蛹肽粉和蠶蛹粕的方法，其特征在于：步驟（6）尿素包埋中尿素:甲醇:蠶蛹脂肪酸的體積比為1:2.6:0.8。

7.根據權利要求1所述的水相生物酶法生產蠶蛹肽粉和蠶蛹粕的方法，其特征在于：步驟（6）中所述α-亞麻酸經過分子蒸餾進一步提純獲得純度≥85.0%的α-亞麻酸，具體操作條件如下：采用三級分子蒸餾，蒸餾溫度90~105℃，操作壓力0.5~2.5Mpa，進料溫度70℃，進料速率1.8~1.9L/min，刮膜轉速160r/min。