[發明專利]一種可溶性抗體抗原表位篩選的方法

無效

• 申請號: 201310519879.6
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN103592440A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 王景文
• 申請（專利權）人: 王景文
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種生化的檢測方法，具體來說，是指一種可溶性抗體抗原表位篩選的方法。?

背景技術

化療是人民目前治療腫瘤尤其是惡性腫瘤的主要方法，在化療過程中出現的多藥耐藥是腫瘤化療的最主要障礙，其中可溶性抗體的過表達是引發腫瘤細胞的最主要原因。目前用于腫瘤多藥耐藥性檢測和治療的大多為完整抗體，組織穿透能力差，在血液和非瘤組織的清除速度比較慢。本發明試圖探究一種構建大腸癌抗體的原核表達載體，制備純化處具有一定生物活性的抗體，該抗體的篩選有望為大腸癌等腫瘤細胞的多藥耐藥性的檢測和治療提供新的選擇。?

發明內容

為克服上述技術問題，我們提出了以下技術方案：?

一種可溶性抗體抗原表位篩選的方法，用合成的P－gp肽段10肽、12肽、16肽包被ELISA反應21板;?3%?BSA?4?℃封閉過夜;次日加入含Fab抗體的樣品，陰性對照加pComb3裂菌上清，空白對照加TBS，37℃孵育2?h;分別

加入1:?800稀釋的FITC標記的山羊抗小鼠IgG抗體，37℃孵育2?h;?TBST洗板后，熒光酶標儀讀值:激發波長為495?nm，吸收波長為535nm。

本發明中，同樣條件下重復3次，最后對結果進行統計學處理。?

本發明的有益效果是，實驗數據準確，可以定性、定量分析，同時為后續展開的人源化提供依據和支持。?

具體實施方式

其步驟為，首先用合成的P－gp肽段10肽、12肽、16肽包被ELISA反應21板;?3%?BSA?4?℃封閉過夜;次日加入含Fab抗體的樣品，陰性對照加pComb3裂菌上清，空白對照加TBS，37℃孵育2?h;分別加入1:?800稀釋的FITC標記的山羊抗小鼠IgG抗體，37℃孵育2?h;?TBST洗板后，熒光酶標儀讀值:激發波長為495?nm，吸收波長為535nm。同樣條件下重復3次，最后對結果進行統計學處理。?

以上所述，僅為本發明較佳的具體實施方式，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。?