[發(fā)明專(zhuān)利]小粒徑納米顆粒的制備方法及納米顆粒藥物載體

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310516245.5
• 申請(qǐng)日: 2013-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103520112A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡林濤;趙鵬飛;鄭明彬;龔萍;岳彩霞;羅震宇;鄭翠芳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳先進(jìn)技術(shù)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): A61K9/14
• 分類(lèi)號(hào): A61K9/14;A61K47/34;A61K47/24;B82Y5/00
• 代理公司: 深圳市科進(jìn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44316
• 代理人: 沈祖鋒;郝明琴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及納米藥物領(lǐng)域，具體涉及一種小粒徑納米顆粒的制備方法，以及由此制得的納米顆粒藥物載體。

背景技術(shù)

胰腺癌、膀胱癌等癌癥的致密瘤一直是癌癥治療的難題。在納米抗癌藥物的研究中，使用納米載體包載抗腫瘤藥物制備成納米藥物，并利用載體自身的代謝特點(diǎn)將藥物輸送到腫瘤部位，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的高效治療。以聚合物、脂質(zhì)體或脂-聚合物為原料的納米載體因具有生物相容性好、高效包載和傳輸藥物與基因等優(yōu)勢(shì)被廣泛應(yīng)用于臨床研究。

然而常規(guī)的納米抗癌藥物多存在生物安全性低的問(wèn)題，且因粒徑過(guò)大（通常大于100nm）和生物相容性差等原因，無(wú)法在致密瘤中有效富集，因此療效甚微。無(wú)法用于活體實(shí)驗(yàn)或抑制這類(lèi)腫瘤的生長(zhǎng)和復(fù)發(fā)。

通過(guò)改善納米藥物的理化性質(zhì)（粒徑、表面電荷、化學(xué)修飾等）可以改善納米抗癌藥物在致密瘤中的有效富集，并因此實(shí)現(xiàn)對(duì)此類(lèi)腫瘤的有效抑制。Chauhan等通過(guò)腫瘤血管模擬實(shí)驗(yàn)，證明了粒徑小于40nm的納米顆粒能夠最快的透過(guò)腫瘤血管，但粒徑過(guò)小或過(guò)大都會(huì)使降低顆粒在腫瘤組織中的累積量；Cabral等設(shè)計(jì)了30nm、50nm、70nm和100nm四種粒徑大小的聚合物納米膠束，并證明小于50nm的小粒徑納米膠束具有更好的腫瘤穿透能力和治療效果。因此需要設(shè)計(jì)一種簡(jiǎn)易的、粒徑在30～50nm之間的小粒徑納米顆粒，解決現(xiàn)有技術(shù)中的問(wèn)題，并用于致密瘤的藥物治療研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種表面帶負(fù)電的小粒徑納米藥物載體，以及制備這種納米藥物載體的方法。

本發(fā)明包括一種小粒徑納米顆粒的制備方法，包括步驟：配制溶液：PLGA溶于乙腈中；卵磷脂、DSPE-PEG分別溶于乙醇水溶液中；磷脂成膜：混合卵磷脂溶液與DSPE-PEG溶液，超聲混勻，并去除溶劑，以形成磷脂膜；納米沉淀自組裝：將PLGA溶液加入成膜的容器中，混合后，在60-65℃保溫，以使PLGA與磷脂納米沉淀自組裝成納米顆粒；以及超濾收集：超濾離心收集得到的納米顆粒。

一些實(shí)施例中，磷脂成膜步驟中，混合溶液中包含相等質(zhì)量的卵磷脂與DSPE-PEG。

一些實(shí)施例中，磷脂成膜步驟包括將卵磷脂溶液和DSPE-PEG溶液與乙醇水溶液混合，并超聲混合的操作。

一些實(shí)施例中，納米沉淀自組裝步驟中的保溫時(shí)間可以為2-3小時(shí)。

一些實(shí)施例中，納米沉淀自組裝步驟中，PLGA與總磷脂的質(zhì)量比可以為3-5：1。

一些實(shí)施例中，納米沉淀自組裝步驟包括先將PLGA溶液與乙醇水溶液混合，再加入成膜的容器中的操作。

一些實(shí)施例中，超濾收集步驟中，使用10kDa的超濾膜收集納米顆粒。

本法另一方面提供根據(jù)以上方法制備得到的納米顆粒藥物載體，該納米顆粒藥物載體的平均粒徑可以為30-50nm，并且表面帶負(fù)電，其表面電位可以為-30至-60mV。

本發(fā)明通過(guò)兩步磷脂成膜及納米沉淀兩步法合成納米顆粒藥物載體，制備方法簡(jiǎn)便。可以獲得粒徑在30-50nm范圍的小粒徑納米顆粒，腫瘤穿透性強(qiáng)。納米顆粒表面帶負(fù)電，在生物體中具有更高的循環(huán)穩(wěn)定性。本發(fā)明制備得到的納米顆粒可以作為藥物載體，包載多種疏水性、親水性和兩親性藥物，應(yīng)用廣泛。

附圖說(shuō)明

圖1為根據(jù)本發(fā)明的方法合成的小粒徑納米顆粒的TEM圖。

圖2為根據(jù)本發(fā)明的方法合成的納米顆粒的粒度分析結(jié)果。

具體實(shí)施方式

為了克服現(xiàn)有納米顆粒（NPs）藥物載體因粒徑過(guò)大、生物相容性差，而造成的在致密瘤中富集性差，進(jìn)而導(dǎo)致療效差的問(wèn)題，本發(fā)明設(shè)計(jì)了一種小粒徑納米顆粒的簡(jiǎn)單制備方法，以提供一種包載多種藥物的，用于納米藥物治療致密腫瘤的載體平臺(tái)。

本發(fā)明制備小粒徑納米顆粒的方法使用聚乙交酯丙交酯（PLGA）和磷脂作為主要原料，制備形成磷脂包裹的PLGA納米顆粒。通過(guò)磷脂成膜、納米沉淀自組裝的兩步法合成小粒徑NPs。

具體地，本發(fā)明的制備方法主要包括四個(gè)步驟：配制溶液、磷脂成膜、納米沉淀自組裝，以及超濾收集。應(yīng)理解，盡管以下按照該順序描述這些步驟，這些步驟的具體順序不限于此，例如不必須首先配制全部溶液，還可以?xún)H在磷脂成膜、納米沉淀自組裝步驟之前配制該步驟中要使用的溶液。