[發明專利]AG15多肽的完全抗原及其制備方法和抗體無效
| 申請號: | 201310514563.8 | 申請日: | 2013-10-25 |
| 公開(公告)號: | CN103554249A | 公開(公告)日: | 2014-02-05 |
| 發明(設計)人: | 任培根;郭成志;李健;郭小勇 | 申請(專利權)人: | 中國科學院深圳先進技術研究院 |
| 主分類號: | C07K14/795 | 分類號: | C07K14/795;C07K14/47;C07K16/18 |
| 代理公司: | 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人: | 吳平 |
| 地址: | 518055 廣東省深圳*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | ag15 多肽 完全 抗原 及其 制備 方法 抗體 | ||
1.一種AG15多肽的完全抗原,其特征在于,所述AG15多肽的完全抗原由AG15多肽和交聯劑活化的匙孔血藍蛋白偶聯形成;
其中,所述AG15多肽的序列為SEQ?ID?No.1所示的序列,所述AG15多肽通過半胱氨酸與所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白偶聯。
2.根據權利要求1所述的AG15多肽的完全抗原,其特征在于,所述AG15多肽與所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白的摩爾比為800~1000:1。
3.根據權利要求1所述的AG15多肽的完全抗原,其特征在于,所述交聯劑為馬來酰亞胺。
4.一種AG15多肽的完全抗原的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
提供交聯劑活化的匙孔血藍蛋白,并用磷酸鈉緩沖液對所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白進行重構,得到重構后的交聯劑活化的匙孔血藍蛋白溶液;
提供AG15多肽,并將所述AG15多肽用偶聯緩沖液或雙蒸水溶解,得到AG15多肽溶液;
將所述重構后的交聯劑活化的匙孔血藍蛋白溶液和所述AG15多肽溶液混勻后充分反應,分離純化后得到由所述AG15多肽和所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白偶聯形成AG15多肽的完全抗原,其中,所述AG15多肽的序列為SEQ?ID?No.1所示的序列,所述AG15多肽通過半胱氨酸與所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白偶聯。
5.根據權利要求4所述的AG15多肽的完全抗原的制備方法,其特征在于,所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白溶液的濃度為5mg/mL;
所述AG15多肽溶液的濃度為8mg/mL。
6.根據權利要求4所述的AG15多肽的完全抗原的制備方法,其特征在于,將所述重構后的交聯劑活化的匙孔血藍蛋白溶液和所述AG15多肽溶液混勻的操作中,所述AG15多肽與所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白的摩爾比為800~1000:1。
7.根據權利要求4所述的AG15多肽的完全抗原的制備方法,其特征在于,所述交聯劑為馬來酰亞胺。
8.根據權利要求4所述的AG15多肽的完全抗原的制備方法,其特征在于,分離純化后得到由所述AG15多肽和所述交聯劑活化的匙孔血藍蛋白偶聯形成AG15多肽的完全抗原的操作為:
用30mL含有質量百分數為0.01%的疊氮鈉PBS緩沖液平衡Sephadex?G-25M凝膠柱,接著向所述Sephadex?G-25M凝膠柱加入反應液,用總體積10mL的所述PBS緩沖液洗滌,收集洗出液,每次收集0.5mL~1.0mL,在280nm下測量吸光度值,根據吸光度值收集含蛋白洗脫液。
9.一種AG15多肽的完全抗原的抗體,其特征在于,所述AG15多肽的完全抗原的抗體與如權利要求1~3中任一項所述的AG15多肽的完全抗原特異性結合。
10.一種AG15多肽的完全抗原的抗體,其特征在于,所述AG15多肽的完全抗原的抗體為如權利要求1~3中任一項所述的AG15多肽的完全抗原作為抗原被免疫系統識別后表達得到的抗體,所述AG15多肽的完全抗原的抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。
11.根據權利要求10所述的AG15多肽的完全抗原的抗體,其特征在于,所述AG15多肽的完全抗原的抗體為兔源的多克隆抗體。
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