[發明專利]重組靈芝免疫調節蛋白在制備治療帕金森病藥物中的應用

無效

• 申請號: 201310513961.8
• 申請日: 2013-10-25
• 公開（公告）號: CN103536901A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 孫非;梁重陽;張喜田
• 申請（專利權）人: 張喜田;孫非
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;A61P25/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及的重組靈芝免疫調節蛋白是由基因重組技術，以巴斯德畢赤酵母為表達載體，深度發酵表達的重組靈芝免疫調節蛋白在制備治療帕金森病藥物中的應用，尤其涉及重組靈芝免疫調節蛋白在治療帕金森病方面的用途，屬于生物制藥工程領域。?

背景技術

帕金森病（Parkinson’s?disease，PD）是一種常見于中老年人的第二大神經退行性疾病，為老年人兩大慢性殺手之一。隨著老齡化社會的來臨，PD患病率正在世界范圍內逐年增高，據世界帕金森病協會資料顯示，全球現有超過400萬帕金森病患者。我國目前約有帕金森病患者200萬，居全球第一，而且每年還要新增約10萬患者。由此帕金森病已經成為我國乃至世界各國面臨的重大醫學和社會問題。

帕金森病的特征性病理變化是中腦黑質致密部多巴胺(DA)能神經元的變性死亡，殘存神經元胞漿內嗜伊紅路易小體（Lewy?body，LB）形成，以及紋狀體DA遞質含量減少。PD主要有四大癥狀：靜止性震顫、肌強直、動作緩慢、姿勢平衡障礙。近年來發現PD還出現認知功能下降、情緒障礙等非運動癥狀。引起PD病理改變的確切病因目前尚未清楚。許多研究提示PD的發生是多因素共同作用的結果，如：環境因素、基因突變、年齡老化、線粒體功能障礙、氧化應激、免疫炎性、興奮性氨基酸毒性、凋亡、泛素蛋白酶體系統功能障礙等，這些發病因素在動物模型和PD患者研究中均己得到有力證實。

在治療方面從60年代開始使用左旋多巴到現在神經保護藥物及外科手術方法的不斷問世也正在使帕金森病患者的痛苦逐漸減少。但目前并沒有能從根本上控制PD病情進展的藥物或治療方法，而且現有的各種療法都有其局限性。因此還需要進一步對PD的發病機制進行更深入的研究，并不斷探索更加有效的PD治療藥物，并對PD不同時期機體與抗帕金森藥物之間的相互作用進行更深入的探索。

靈芝免疫調節蛋白（Immunoregulatory?Protein?of?Ganoderma?lucidium，LZ-8）是1989年Kino等從靈芝菌絲體提取物中分離和純化的小分子蛋白質，命名為LZ-8，并測定其氨基酸順序和免疫生理活性。蛋白質測序表明LZ-8由110個氨基酸殘基組成，氨基端乙酰化，分子量為12.4KD，等電點為4.4。靈芝免疫調節蛋白的主要功能在于它可以促進末梢淋巴細胞和脾臟細胞的增生，誘導動物和人體的巨噬細胞分泌多種細胞因子進而防御及消除病原體的侵害，維護機體的健康。

PD發生后，細胞免疫、體液免疫的變化，小膠質細胞、星形膠質細胞活性的改變，以及各種細胞因子水平的變化，均可導致PD嚴重程度的變化。很多研究也證明，使用抗炎類藥物，可能對黑質多巴胺神經元有保護作用。本發明的積極效果在于首次公開了重組靈芝免疫調節蛋白rLZ-8對帕金森病的治療作用，其不僅能在小鼠模型體內具有抗帕金森病作用，并且無副作用，對應用重組靈芝免疫調節蛋白研制抗帕金森病藥物有一定的積極作用。

發明內容

本發明所述的重組靈芝免疫調節蛋白是由基因重組技術，以巴斯德畢赤酵母為表達載體，發酵表達的重組靈芝免疫調節蛋白rLZ-8，本發明主要內容是通過大量的實驗表明rLZ-8在制備治療帕金森病中的應用具體發明內容如下：

本發明人通過大量的在體動物帕金森病模型實驗，通過爬桿實驗、懸掛實驗、轉棒實驗3方面考察了由MPTP所致的小鼠行為學障礙，經過連續治療后得到rLZ-8能夠有效治療和改善由MPTP所致的小鼠行為學障礙；采用免疫組化法檢測酪氨酸氫化酶(TH)陽性細胞數量，來考察rLZ-8對MPTP所致的小鼠多巴胺能神經元損傷修復效果，實驗結果表明MPTP模型組的TH陽性細胞數量明顯較少，殘存神經元多萎縮，rLZ-8組黑質致密部的TH陽性細胞形態基本正常，結構完整，數目明顯多于MPTP組。