[發(fā)明專利]拮抗抑制程序性死亡受體PD-1與其配體結(jié)合的單克隆抗體及其編碼序列與用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310512512.1
• 申請日: 2013-10-25
• 公開（公告）號: CN104558177B
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅師平;胡紅群;宋曉琦;陳蕞;孫亞男;蔡明文;袁燕萍;周建鷹;羅昊;劉海云;周群敏;徐一清
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州思坦維生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 王函

1.一種拮抗抑制程序性死亡受體PD-1與其配體結(jié)合的鼠源單克隆抗體，其特征在于，所述抗體的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述抗體的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述鼠源單克隆抗體特異性結(jié)合PD-1；。

2.一種編碼權(quán)利要求1所述抗體的DNA分子，其特征在于，其輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

3.一種拮抗抑制程序性死亡受體PD-1與其配體結(jié)合的人-鼠嵌合抗體，其特征在于，將權(quán)利要求1所述的重鏈可變區(qū)和來源于人的抗體重鏈恒定區(qū)相連，和將權(quán)利要求1所述的抗體輕鏈可變區(qū)與來源于人的抗體輕鏈恒定區(qū)相連，所述人-鼠嵌合抗體的輕鏈抗原互補決定區(qū)的CDR1、CDR2及CDR3的氨基酸序列分別如SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6及SEQ ID NO：7所示；所述人-鼠嵌合抗體的重鏈抗原互補決定區(qū)的CDR1、CDR2及CDR3的氨基酸序列分別如SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9及SEQ ID NO：10所示；所述人-鼠嵌合抗體特異性結(jié)合PD-1。

4.一種編碼權(quán)利要求3所述人-鼠嵌合抗體的DNA分子，其特征在于，其輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

5.一種表達載體，其特征在于，它含有權(quán)利要求4所述的DNA分子序列以及與該序列操作性相連的表達調(diào)控序列。

6.一種重組宿主細胞，其特征在于，它是用權(quán)利要求5所述的表達載體轉(zhuǎn)化宿主細胞而成。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組宿主細胞，其特征在于，所述重組宿主細胞或其子代細胞表達權(quán)利要求3所述的人-鼠嵌合抗體。

8.一種制備權(quán)利要求3所述的人-鼠嵌合抗體的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

a)提供一表達載體，該表達載體含有權(quán)利要求4所述的DNA分子序列以及與該序列操作性相連的表達調(diào)控序列；

b)用步驟a)所述的表達載體轉(zhuǎn)化宿主細胞；

c)在適合所述人源化單克隆抗體表達的條件下培養(yǎng)步驟b)所得的宿主細胞：和

d)采用親合層析從宿主細胞培養(yǎng)液中分離純化獲得所述抗體。

9.一種用于定量或定性檢測分析樣品中的PD-1蛋白的試劑或試劑盒，其特征在于，其包括如權(quán)利要求1或權(quán)利要求3所述的抗體。

10.如權(quán)利要求9所述的試劑或試劑盒，其特征在于，其以如權(quán)利要求1或權(quán)利要求3所述的抗體為第一抗體，與化學(xué)標(biāo)記的第二抗體合并使用。