[發(fā)明專利]負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310511279.5
• 申請(qǐng)日: 2013-10-25
• 公開（公告）號(hào): CN103768612A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顧忠偉;張成元;羅奎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/48
• 分類號(hào): A61K47/48;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 成都天嘉專利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 鄒翠

1.負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)，其特征在于：給藥系統(tǒng)為抗腫瘤藥物阿霉素、靶向功能性因子GFLG和PEG化肽類樹狀大分子的偶聯(lián)物，其結(jié)構(gòu)如下：

其中，A的結(jié)構(gòu)為：

B為PEG化的3~5代肽類樹狀大分子，樹狀大分子的末端氨基與基團(tuán)A連接。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)，其特征在于：所述肽類樹狀大分子的末端總共連接有1個(gè)或者多個(gè)所述的A基團(tuán)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)，其特征在于：所述的肽類樹狀大分子為賴氨酸或者谷氨酸的肽類樹狀大分子。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)，其特征在于：所述PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)的顆粒粒徑為??90~122nm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：先在阿霉素與GFLG的偶聯(lián)物上引入甲基乙烯基，得到偶聯(lián)物MA-GFLG-DOX，備用；再將作為載體的肽類樹狀大分子炔基化，在樹狀大分子上引入三苯甲硫基，得到炔基三苯甲硫基樹狀大分子，脫去三苯甲基后，與偶聯(lián)物MA-GFLG-DOX發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)，得到炔基化樹狀大分子與阿霉素的偶聯(lián)物，最后經(jīng)PEG化得成品。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：本發(fā)明的制備方法具體操作步驟如下：

?A??MA-GFLG-DOX偶聯(lián)物的制備

以Boc-GFLG-OMe為原料，與甲基乙烯酰氯反應(yīng)制得MA-GFLG-OH，后MA-GFLG-OH與N，N-二異丙基乙胺、四氫噻唑-2-硫酮反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物、阿霉素鹽酸鹽、吡啶溶解在無水二甲亞砜中，避光反應(yīng)，反應(yīng)所得產(chǎn)物為MA-GFLG-DOX偶聯(lián)物；

B炔基化樹狀大分子的合成

以Boc與Cbz基團(tuán)保護(hù)的樹狀大分子為原料，在氫氣氛圍下與Pb/C反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物溶解在DMF當(dāng)中，體系中加入N，N-二異丙基乙胺、己炔酸、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽、1-羥基苯并三唑，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)，反應(yīng)所得產(chǎn)物為炔基化樹狀大分子；

C?炔基三苯甲硫基樹狀大分子的合成

炔基化樹狀大分子溶解在無水二氯甲烷與三氟乙酸的混合溶劑中，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)，將反應(yīng)產(chǎn)物溶解在無水DMF中，體系中加入N，N-二異丙基乙胺、3-三苯甲硫基丙酸、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽、1-羥基苯并三唑，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)，反應(yīng)所得產(chǎn)物為炔基三苯甲硫基樹狀大分子；

D?炔基化樹狀大分子-阿霉素偶聯(lián)物的合成

炔基三苯甲硫基樹狀大分子溶解在無水二氯甲烷與三氟乙酸的混合溶劑中，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)；當(dāng)溶液轉(zhuǎn)為黃綠色后，體系加入三乙基硅烷，反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物溶解在無水DMF當(dāng)中，溶液中加入偶聯(lián)物MA-GFLG-DOX、1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下避光反應(yīng)，反應(yīng)所得產(chǎn)物為炔基化樹狀大分子-阿霉素偶聯(lián)物；

E??PEG化樹狀大分子

在氮?dú)鈿夥障拢瑢⑷不瘶錉畲蠓肿?阿霉素偶聯(lián)物、CuSO₄·5H₂O、N₃-mPEG、抗壞血酸鈉加入到DMF?和H₂O的混合溶劑當(dāng)中，反應(yīng)體系避光反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物經(jīng)提純、透析、凍干得到PEG化樹狀大分子-阿霉素偶聯(lián)物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：所述的B和C步驟，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)結(jié)束后，溶液用乙酸乙酯稀釋，并依次用NaHCO₃、HCl、NaHCO₃、NaCl洗滌，有機(jī)相用無水MgSO₄干燥，并用減壓蒸餾除去溶劑，殘留物經(jīng)重結(jié)晶，得到產(chǎn)物。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：所述的D步驟，溶液中加入偶聯(lián)物MA-GFLG-DOX、1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯后，在氮?dú)獗Ｗo(hù)及室溫下避光反應(yīng)0.1~90小時(shí)。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的負(fù)載阿霉素的PEG化肽類樹狀大分子靶向給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：所述的D步驟，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液逐滴加入到乙酸乙酯當(dāng)中，析出物通過離心、提純、干燥，得到炔基化樹狀大分子-阿霉素偶聯(lián)物。