[發(fā)明專利]蛹蟲草可結實性生產(chǎn)種源長久保藏方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310509054.6
• 申請日: 2013-10-23
• 公開（公告）號: CN103563651A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發(fā)明（設計）人: 王升厚;李鋒;徐方旭;柳葉飛;張林;白冰
• 申請（專利權）人: 沈陽師范大學;沈陽蟲林密寶北蟲草食品科技有限公司
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 沈陽維特專利商標事務所(普通合伙) 21229
• 代理人: 甄玉荃

1.一種蛹蟲草可結實性生產(chǎn)種源長久保藏方法，其特征在于，包括如下的步驟：

1）將選育獲得的蛹蟲草可結實性優(yōu)良母種種源作為初始實驗種源，種源形式為斜面固體母種；

2）將液體菌種培養(yǎng)基分裝于250毫升錐型瓶或白色滴流瓶中，每瓶裝培養(yǎng)基100毫升，封口后裝入高壓滅菌鍋中，在1.05Kg/cm²壓強下滅菌60分鐘，待冷卻至25℃以下開始接種；

3）接種后的蛹蟲草液體菌種在20℃±1℃溫度下震蕩培養(yǎng)，震蕩頻率120～130次/分鐘，連續(xù)培養(yǎng)5～7天；選出菌球大小均勻、毛刺銳利、數(shù)量多、培養(yǎng)基液體清澈透明的液體菌種；

4）將步驟3）培養(yǎng)的液體菌種在無菌條件下分裝到25毫升無菌帶蓋冷凍管中，每管10毫升，并進行編號，隨機選出3管，其余全部同時保藏在-72℃至-86℃超級低溫冰箱內；

5）將隨機選出的3管液體菌種按常規(guī)方法進行試栽，試栽結果所選3管菌種都正常出草，則保藏在超級低溫冰箱內的同一批次種源具有可結實性，可以作為生產(chǎn)性種源使用。

2.按照權利要求1所述的蛹蟲草可結實性生產(chǎn)種源長久保藏方法，其特征在于，步驟2）中液體菌種培養(yǎng)基配方為：葡萄糖20克、蛋白胨5克、酵母浸粉3克、磷酸二氫鉀3克、硫酸鎂2克、維生素B₁10毫克、維生素B₂5毫克、水1000毫升，煮沸溶化配方中各成分物質。

3.按照權利要求1所述的蛹蟲草可結實性生產(chǎn)種源長久保藏方法，其特征在于，超級低溫冰箱內液體菌種使用前逐級解凍，具體步驟為：先把液體菌種冷凍管轉到溫度為-24℃至-30℃冰柜中存放24小時，然后轉到溫度為-10℃至-16℃冰柜中存放24小時，最后放入冰水混合0℃環(huán)境中解凍至液體培養(yǎng)基全部溶化。

4.按照權利要求3所述的蛹蟲草可結實性生產(chǎn)種源長久保藏方法，其特征在于，取出液體菌種冷凍管按步驟2）和步驟3）生產(chǎn)液體菌種，培養(yǎng)好的液體菌種作為生產(chǎn)用液體菌種種源再擴繁一次。