[發明專利]用于北極海洋放線菌Streptomycessp.生產大環四重內酯類化合物的培養基

有效

• 申請號: 201310504941.4
• 申請日: 2013-10-23
• 公開（公告）號: CN103555619B
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 蔡孟浩;周嬌;周祥山;張元興
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/08;C12R1/465
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司31100
• 代理人: 陳靜

技術領域

本發明屬于生物技術領域，更具體地，本發明涉及用于北極海洋放線菌Streptomyces sp.(更佳地是Streptomyces sp.R-527F)生產大環四重內酯類化合物(更佳地是Dinactin)的培養基及其制備方法。

背景技術

天然來源的放線菌能產生種類豐富的次級代謝產物，具有新穎獨特結構和潛在生物活性的抗菌劑如鏈霉素、紅霉素、四環素等都是由放線菌產生的。因此，放線菌作為天然藥物資源先導化合物的優良資源被廣泛研究。海洋微生物在新藥開發、新型酶制劑研制等生物技術領域具有廣闊的前景。

遠洋和極地地區地域遼闊，覆蓋了地球系統的低溫、高鹽、高壓、寡營養、巨幅變化的光輻射等多種特殊環境，這些特殊環境造就了微生物在基因結構、遺傳、適應、代謝及產物等方面的獨特性和多樣性，蘊涵著生命進化歷程的豐富信息，是生物遺傳和功能多樣性非常豐富的資源寶藏。開展極地和極端藥源微生物資源的挖掘、儲備和功能研究，獲得該資源技術領域更多自主知識產權具有重要價值。統計表明，新發現的嗜冷菌77%的新種和83%的新屬來自極地環境，因此極地地區是嗜冷菌等重要極端微生物資源的主要源地。

北極海洋放線菌Streptomyces sp.R-527F是由中國極地研究中心自北冰洋73°N以北海域沉積物中分離得到。在該菌株的發酵液對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、白色念珠菌(Candida albicans)等均具有抑制活性，并從中分離得到多種大環四重內脂類化合物，其中Dinactin的生物活性較顯著。

然而，Streptomyces sp.R-527F在原始培養基中生長大環四重內脂化合物的產量很低，成為各項藥物活性評價研究的瓶頸。因此，通過系統地培養基優化及其培養環境、發酵工藝以期實現高產發酵是亟待解決的問題。因此開發一種促進北極海洋放線菌Streptomyces sp.R-527F合成Dinactin的新型培養基是實 現大規模高效發酵生產的重要基礎。

發明內容

本發明的目的在于提供用于北極海洋放線菌Streptomyces sp.生產大環四重內酯類化合物的培養基及其制備方法。

在本發明的第一方面，提供一種北極海洋放線菌Streptomyces sp.的培養基，所述培養基包括以下組分：

(a)葡萄糖 5-20g/L；

(b)黃豆粉 0.5-12g/L；

(a)和(b)的組分溶于人工海水中；其中，所述的人工海水含有：

在一個優選例中，所述的北極海洋放線菌Streptomyces sp.是Streptomyces sp.R-527F。

在另一優選例中，所述培養基中，葡萄糖和黃豆粉的濃度是：

(a)葡萄糖 4-18g/L；

(b)黃豆粉 1-10g/L；

所述的人工海水含有：

在另一優選例中，所述培養基中，葡萄糖和黃豆粉的濃度是：

(a)葡萄糖 9-18g/L；

(b)黃豆粉 1-6g/L；

所述的人工海水含有：

在另一優選例中，所述培養基中，葡萄糖和黃豆粉的濃度是：

(a)葡萄糖14.89g/L；

(b)黃豆粉2.5g/L；

所述的人工海水含有：

其中，各組分在培養基中的含量按照重量份可在±10%(更佳地±5%)范圍內浮動。

在另一優選例中，所述培養基中，各組分配制于水(較佳地，所述的水是去離子水)中；和/或所述培養基的pH值5.0-5.5。

在另一優選例中，所述的方法還包括：將混勻及調節pH值后的培養基在121℃，滅菌15-20min。

在本發明的另一方面，提供所述的培養基的用途，用于培養北極海洋放線菌Streptomyces sp.R-527F，生產大環四重內酯化合Dinactin。

在本發明的另一方面，提供一種制備北極海洋放線菌Streptomyces sp.的培養基的方法，所述方法包括：將前面任一所述的培養基的各組分在水中混勻，調節至pH值5.0-5.5。

在本發明的另一方面，提供一種制備前面任一所述的北極海洋放線菌Streptomyces sp.的培養基的方法，所述方法包括：