[發明專利]一種提高蛹蟲草子實體中蟲草菌素含量的方法

有效

• 申請號: 201310503872.5
• 申請日: 2013-10-24
• 公開（公告）號: CN103598006A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發明（設計）人: 高新華;張紅霞;黃開華;陳偉;楊建軍
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 上海藍迪專利事務所 31215
• 代理人: 徐筱梅

技術領域

本發明涉及蛹蟲草人工栽培技術領域，具體地說是一種人工調控培養條件以提高蛹蟲草子實體中蟲草菌素含量的方法。?

背景技術

蛹蟲草（Cordyceps?militaris），又名北冬蟲夏草，在真菌分類學上屬子囊菌亞門，核菌綱，麥角菌目，麥角菌科，蟲草屬，與冬蟲夏草（Cordyceps?sinensis）同為蟲草屬真菌的一種。蟲草屬真菌是寄生于昆蟲、蜘蛛或大團囊屬植物的地下子實體上形成的一類蟲菌復合物的統稱。蛹蟲草是蟲草屬真菌的模式種，在野外主要寄主于鱗翅目、鞘翅目和雙翅目的一些昆蟲的幼蟲和蛹上，中醫典籍記載它的功效為“味甘、性平，有益肺腎，補精髓，止血化痰”，與冬蟲夏草的功能基本一致。過去，由于蛹蟲草在野外產量稀少，其開發利用并沒有被人們所重視。但自上世紀九十年代末，其大規模人工培養獲得成功以來，其開發利用價值便越來越被人們認識，所開發的產品越來越多，市場需求也越來越大，蛹蟲草子實體的人工栽培正成為一個具有極大經濟價值的新興產業。?

蟲草菌素（cordycepin）又稱蟲草素、3′-脫氧腺苷（3′-deoxyadenosine），是第一個從真菌中分離出來的核苷類抗菌素，是蛹蟲草中最主要的活性成分之一。早在?1950?年，Cunningham?等觀察到被蛹蟲草?Cordyceps?militaris?寄生的昆蟲組織不易腐爛，進而從中分離出一種抗菌性物質，定名為蟲草菌素，并在?Nature?上發表，之后許多學者對其進行了驗證研究。蟲草菌素分子式為?C₁₀H₁₃N₅O₃，其結構式如圖?1，分子量為?251D，堿性，針狀或片狀結晶。蟲草菌素具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒、免疫調節、清除自由基等多種藥理作用【王成明等?2009??王成明，李磊，楊親正，2009.?蟲草活性成分蟲草素臨床應用研究進展.廣州化工，37(5):?42-43】，以蟲草素為主要成分的新藥已在臨床上試用于白血病的治療【Kodama?et?al.?2000??Kodama?EN,?McCaffrey?RP,?Yusa?K,?Mitsuya?H,?2000.?Antileukemic?activity?and?mechanism?of?action?of?cordycepin?against?terminal?deoxynucleotidyl?transferasepositive?(TdT+)?leukemic?cells.?Biochemical?Pharmacology,?59(3):?273-281；蔡友華和劉學銘?2007??蔡友華，劉學銘，2007.?蟲草素的研究與開發進展.?中草藥，38(8):1269-1272】，有著良好的臨床應用前景，蟲草菌素的研究正成為藥物化學中一個極其活躍的領域【楊濤，董彩虹，蟲草素的研究開發現狀與思考。?菌物學報?15?March?2011,30(2):?180-190】。?

人工培養中提高蟲草菌素含量的生產應用主要分為提高液體發酵培養物中蟲草菌素含量、提高固體發酵培養物中蟲草菌素含量和提高子實體中蟲草菌素含量三種途徑。其中液體發酵培養和固體發酵培養主要以獲取蟲草菌素純品為目標。而提高子實體中蟲草菌素含量則是以提高蛹蟲草子實體的商品質量為目標。在提高蟲草菌素含量的方法上，目前已有的技術主要可概括為以下幾個方面：?

第一，通過菌種誘變和選育提高蟲草菌素含量。

就菌株而言，自然界原始菌株的蟲草素產量往往不高。Das?et?al.（2008）用質子束誘變（proton?beam?irradiation）的方法篩選出了蟲草素的高產菌株，比出發菌株的蟲草素含量高出?72%；李文等（2009）選擇合適劑量的低能離子束注入蛹蟲草，獲得菌株的蟲草素產量比出發菌株提高?30%；周禮紅等（2009）通過對蛹蟲草原生質體進行紫外誘變處理，篩選出優良菌株，經固體發酵后，蟲草素含量為出發菌株的?2?倍，連續?15?代傳代培養，蟲草素的含量依然保持穩定。航天誘變技術也用在了蛹蟲草的育種研究之中。2005?年?8?月?29?日中國發射的第?22?顆返回式科學與技術試驗衛星中有?3?支蛹蟲草試管菌種，研究表明航天搭載蛹蟲草的蟲草素含量較原始菌株提高?2.5?倍（溫魯等?2008）。?

第二，通過對培養基中營養成分優化提高蟲草菌素含量。?