[發(fā)明專利]一株鮑曼不動(dòng)桿菌及其篩選方法和在降解偶氮染料剛果紅方面的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310498166.6
• 申請(qǐng)日: 2013-10-22
• 公開（公告）號(hào): CN103756925A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 寧尋安;陽(yáng)重陽(yáng);王玉潔;梁昕;王靖宇;陳國(guó)鑫;林美卿;李銳敬;陳泓;劉敬勇;楊佐毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C02F3/34;C02F3/02;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

技術(shù)領(lǐng)域

?本發(fā)明涉及生物工程、環(huán)境工程技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，涉及一株鮑曼不動(dòng)桿菌及其篩選方法和在降解偶氮染料剛果紅方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

偶氮染料是一類含有1個(gè)或多個(gè)-N=N-功能團(tuán)的芳香類化合物，約占有機(jī)染料產(chǎn)品總量的80%。根據(jù)染料發(fā)色團(tuán)說，其發(fā)色基是偶氮雙鍵(-N?=N-)，助色基是氨基、羥基、甲基和磺酸基等，當(dāng)光線射入后發(fā)生選擇性吸收而產(chǎn)生視覺所感受到的各種顏色。剛果紅是第一個(gè)人工合成的偶氮染料，從它的結(jié)構(gòu)式上可以看出，剛果紅是含有兩個(gè)偶氮雙鍵的活性染料，其水溶性好，但染色的過程中有大量的染料未附著在染色物上而以廢水形式排出，造成水體污染。

目前發(fā)現(xiàn)能降解偶氮染料的微生物主要有真菌、細(xì)菌和藻類三種。但研究與工程應(yīng)用的大量實(shí)踐表明，染料廢水的特殊性導(dǎo)致一般微生物無法或很難在這類廢水中生長(zhǎng)繁殖和發(fā)揮降解作用。同時(shí)，目前發(fā)現(xiàn)的偶氮染料降解菌一般為厭氧降解菌，而國(guó)內(nèi)外學(xué)者的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：厭氧微生物通過還原作用對(duì)染料廢水具有一定的脫色、降解效果，但處理出水中含有大量高毒性、強(qiáng)致癌性的中間產(chǎn)物，如芳香胺化合物等。而對(duì)于單一的好氧降解，目前報(bào)道的很少，同時(shí)從已報(bào)道的文獻(xiàn)可知，它們所產(chǎn)生的偶氮還原酶在結(jié)構(gòu)上差異較大。

同時(shí)目前尚無利用鮑曼不動(dòng)桿菌降解染料的文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是填補(bǔ)現(xiàn)有染料降解微生物技術(shù)的空白，提供一株偶氮染料好氧降解菌。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述偶氮染料剛果紅好氧降解菌的篩選方法。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供所述偶氮染料剛果紅好氧降解菌的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明提供一株偶氮染料好氧降解菌，命名為鮑曼不動(dòng)桿菌（Acinetobacter?baumannii）YNWH?226，于2013年7月15日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（地址是北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)），保藏編號(hào)為CGMCC?No.7922。

所述鮑曼不動(dòng)桿菌YNWH?226鑒定特征如下：

細(xì)菌學(xué)形態(tài)特征為球桿狀，無芽孢、無鞭毛，單個(gè)細(xì)胞大小為（1~1.5μm）×（1.5~2.5μm），菌落光滑，不透明，在含剛果紅的無機(jī)鹽培養(yǎng)基上呈紅色；?

?生理生化特性為：革蘭氏陰性，西蒙氏檸檬酸鹽利用陽(yáng)性，明膠液化陰性，葡萄糖利用陽(yáng)性。能在以剛果紅為唯一碳源和能源，且好氧條件下生長(zhǎng)。

本發(fā)明還提供了鮑曼不動(dòng)桿菌YNWH?226的16S?rRNA基因序列，如SEQ?ID?NO.1所示。該序列與鮑曼不動(dòng)桿菌（Acinetobacter?baumannii）DSM?30007的16S?rRNA基因序列高度同源，同源性為99%。

本發(fā)明同時(shí)提供該鮑曼不動(dòng)桿菌YNWH?226的篩選方法，包括如下步驟：

S1.取印染廢水處理廠好氧池的廢水置于LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到初培養(yǎng)液；

S2.取S1所述的初培養(yǎng)液置于含1g/L剛果紅的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)得培養(yǎng)液；

S3.取S2所述的培養(yǎng)液置于含1g/L剛果紅的新鮮無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)得終培養(yǎng)液；

S4.取S3所述的終培養(yǎng)液稀釋后均勻涂布于含1g/L剛果紅的固體無機(jī)鹽培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)；

S5.從S4所述固體無機(jī)鹽培養(yǎng)基平板上挑取菌落分離純化即得單菌落。

所述的LB培養(yǎng)基配方為：

S2、S3所述的所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基配方為：1.6g/L的K₂HPO₄，0.2g/L的KH₂PO₄?()，1.0g/L?的(NH₄)₂SO₄，0.01g/L?的FeSO₄·7H₂O?，0.1g/L的NaCl?，0.02g/L的CaCl₂·6H₂O?，0.1g/L的MgSO₄，pH7.0。

S4所述的固體無機(jī)鹽培養(yǎng)基平板的組成配方為S3所述的所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基加入16~20g/L的瓊脂。

本發(fā)明還提供了所述偶氮染料好氧降解菌在降解偶氮染料剛果紅方面的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述偶氮染料好氧降解菌應(yīng)用于含偶氮染料剛果紅廢水脫色、凈化處理方面。

本發(fā)明的有益效果：